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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 【求助/交流】Basta能否用来筛选大肠杆菌
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2004150517

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】Basta能否用来筛选大肠杆菌

本人最近在做一个平端连接，是将bar插入到载体中，考虑到链接效率不高，假阳性太多，不仅增加后续工作量，还可能没有结果。因此向各位请教下是否能直接用插入的基因bar作为筛选标记，挑选重组子。
其实问题就是，大肠杆菌能否用Basta来筛选，筛选的能度如何？

我们的启动子经过验证是能在大肠杆菌中起作用的，启动基因表达的。
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1楼 2011-01-18 09:23:38
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匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
6楼2012-05-10 10:55:34
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
我也感兴趣 你试试不是就知道了
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3楼2011-01-19 11:09:08
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yxxhnx

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
jhu132llh(金币+1): 鼓励交流 2011-10-31 19:24:01
请问楼主，您验证过了吗？
大肠杆菌可否用Basta筛选？浓度是多大？
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4楼2011-10-31 14:00:51
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zqx128

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
jhu132llh: 金币+3, 鼓励积极交流 2012-04-21 17:13:32
引用回帖:
406610楼: Originally posted by 2004150517 at 2011-01-18 09:23:38:
本人最近在做一个平端连接，是将bar插入到载体中，考虑到链接效率不高，假阳性太多，不仅增加后续工作量，还可能没有结果。因此向各位请教下是否能直接用插入的基因bar作为筛选标记，挑选重组子。
其实问题就是， ...

草铵膦（又名草丁膦）属有机磷类除草剂, 是非选择性广谱除草剂Basta的活性成份，在一些文献中常被称为膦丝菌素（Phosphinothricin，PPT），它通过植物的叶片或其它绿色部分快速吸收。草铵膦强烈抑制植物中谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase, GS)活性，从而导致植物体内氮代谢紊乱，铵过量积累，叶绿体解体，进而光合作用受抑制，最终导致植物死亡。
根据以上原理，应该是不能用Basta来筛选大肠杆菌。
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5楼2012-04-20 11:43:19
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