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2004150517

铁虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】Basta能否用来筛选大肠杆菌

本人最近在做一个平端连接，是将bar插入到载体中，考虑到链接效率不高，假阳性太多，不仅增加后续工作量，还可能没有结果。因此向各位请教下是否能直接用插入的基因bar作为筛选标记，挑选重组子。
其实问题就是，大肠杆菌能否用Basta来筛选，筛选的能度如何？

我们的启动子经过验证是能在大肠杆菌中起作用的，启动基因表达的。

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1楼 2011-01-18 09:23:38

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zqx128

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jhu132llh: 金币+3, 鼓励积极交流 2012-04-21 17:13:32

引用回帖:

406610楼: Originally posted by 2004150517 at 2011-01-18 09:23:38:
本人最近在做一个平端连接，是将bar插入到载体中，考虑到链接效率不高，假阳性太多，不仅增加后续工作量，还可能没有结果。因此向各位请教下是否能直接用插入的基因bar作为筛选标记，挑选重组子。
其实问题就是， ...

草铵膦（又名草丁膦）属有机磷类除草剂, 是非选择性广谱除草剂Basta的活性成份，在一些文献中常被称为膦丝菌素（Phosphinothricin，PPT），它通过植物的叶片或其它绿色部分快速吸收。草铵膦强烈抑制植物中谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase, GS)活性，从而导致植物体内氮代谢紊乱，铵过量积累，叶绿体解体，进而光合作用受抑制，最终导致植物死亡。
根据以上原理，应该是不能用Basta来筛选大肠杆菌。