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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】IP新手求教：beads和细胞裂解液孵育之后可以直接放到-70度冻存吗？
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sanmaoecho

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】IP新手求教：beads和细胞裂解液孵育之后可以直接放到-70度冻存吗？

如题，beads和细胞裂解液4度孵育过夜之后可以直接放到-70度冻存吗？等到跑胶的时候再拿出来进行后面的离心，弃上清，洗beads等操作,蛋白煮沸变性等操作，不知道可否？
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1楼 2011-01-13 13:36:59
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路人甲007

木虫 (正式写手)
★ ★
dhd997(金币+2):谢谢交流 2011-01-13 15:11:41
sanmaoecho(金币+1): 2011-01-13 17:02:30
貌似不是很好吧  我以前做的时候都是挂好柱子之后就直接洗下来了
你想想 你的beads的贮存条件是四度 你要是放-80度会不会对你的beads造成损害呢
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-01-13 14:30:18
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sanmaoecho

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 路人甲007 at 2011-01-13 14:30:18:
貌似不是很好吧  我以前做的时候都是挂好柱子之后就直接洗下来了
你想想 你的beads的贮存条件是四度 你要是放-80度会不会对你的beads造成损害呢

当时没想那没多，因为没有马上跑胶就冻起来了。
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3楼2011-01-13 17:03:32
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路人甲007

木虫 (正式写手)
★
sanmaoecho(金币+1): 2011-01-14 10:58:04
最爱花诗雨(金币+1):鼓励参与 2011-01-14 21:16:54
引用回帖:
Originally posted by sanmaoecho at 2011-01-13 17:03:32:

当时没想那没多，因为没有马上跑胶就冻起来了。

那你试试吧  单纯的做SDS-PAGE没关系
但是我觉得你要是将蛋白洗脱的时候 有没有影响就不知道了
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-01-13 19:20:17
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sanmaoecho

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 路人甲007 at 2011-01-13 19:20:17:

那你试试吧  单纯的做SDS-PAGE没关系
但是我觉得你要是将蛋白洗脱的时候 有没有影响就不知道了

我就是怕洗脱的时候把结合的蛋白都洗脱下来了。。。
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5楼2011-01-14 10:58:56
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路人甲007

木虫 (正式写手)
是HIS的吗  那你用咪唑的浓度由低到高试试
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6楼2011-01-14 20:33:32
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wang_zhen

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 路人甲007 at 2011-01-13 19:20:17
那你试试吧  单纯的做SDS-PAGE没关系
但是我觉得你要是将蛋白洗脱的时候 有没有影响就不知道了...

请问，做SDS-PAGE的话，用裂解液的上清做可以吗？只是想看看目的蛋白的表达量。要注意些什么吗?
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7楼2013-04-21 14:57:54
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