【求助/交流】做连接后的质粒是否可以用来做pcr - 微生物 - 综合其他 - 小木虫论坛-学术科研互动平台

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manman424

禁虫 (初入文坛)

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1楼 2011-01-12 10:48:06

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manman424

禁虫 (初入文坛)

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9楼2011-01-13 10:07:41

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xulanzzz

金虫 (著名写手)

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★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-12 15:56:38

连接的产物可以直接PCR来验证是否连接成功，但是唯一的问题就是若仅有一点连接成功的话就可以PCR出阳性结果，但是能否转化成功就有很多因素，比如感受态效率等等，连接产物PCR就以连接产物做模板，模板量1微升足够，常规PCR即可。。。

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DOBEST

2楼2011-01-12 10:52:11

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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-12 15:56:43

可以直接作为PCR模板的，有的人推荐单酶切处理后作模板。

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3楼2011-01-12 15:52:34

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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

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专业: 抗肿瘤药物药理

★
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为啥还要酶切质粒再连接呢直接pcr 不就行么

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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋

4楼2011-01-12 18:46:30

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