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【求助】感受态细胞制备
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yabing0324
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【求助】感受态细胞制备
大家好!
我在震荡培养至OD600到0.5,后,分装到4个50ml离心管中,按照步骤要冰上放置10分钟,然后离心收集菌体,但是,由于离心机出了点问题,耽误了四十分钟,就是说在冰上放置了将近一个小时,才离心的,呜哇哇,不知道影响大吗?
[
Last edited by rainwander on 2011-1-6 at 17:40
]
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1楼
2011-01-06 16:28:26
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yabing0324
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Originally posted by
zmw_520
at 2011-01-06 18:46:17:
应该没什么问题,只是想说一般OD600到0.3-0.4,最好是0.3多一点点比较好,你那个0.5有点大了~~~感受态做得好最主要的是0.3那个点111
哦,那我那个估计不好了。。。。。
先用下试一试
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7楼
2011-01-06 21:57:11
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yabing0324(金币+3):又快又好! 2011-01-06 16:39:08
冰上放置时间越长越好。
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2011-01-06 16:30:14
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rainwander(金币+2):恩,多少会有一点点影响的,问题应该不大~~~ 2011-01-06 17:41:47
yabing0324(金币+1): 2011-01-06 21:59:23
引用回帖:
Originally posted by
yabing0324
at 2011-01-06 16:28:26:
大家好!
我在震荡培养至OD600到0.5,后,分装到4个50ml离心管中,按照步骤要冰上放置10分钟,然后离心收集菌体,但是,由于离心机出了点问题,耽误了四十分钟,就是说在冰上放置了将近一个小时,才离心的,呜哇 ...
一般要求冰上放置30min,但是楼上说“冰上放置时间越长越好”令人费解,若冰上放置1h应该也没有什么问题,具体有没有影响可以做个试验对照一下看看,我觉得只是在冰上放置的过程中菌体仍在生长增值,OD值会变大一点点!
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2011-01-06 17:25:59
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1949stone(金币+1):谢谢交流 2011-01-06 21:20:58
yabing0324(金币+1): 2011-01-06 21:59:31
嗯 嗯,40分钟问题不大,有文献报道化转法,冰上放置6h效果最好,呵呵,不知道你用的是什么转化方法,离心机出问题,记得先预冷,不然影响很大哦
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4楼
2011-01-06 18:29:57
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