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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR结果突然和以前不同
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2207993

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR结果突然和以前不同

PCR电泳图，条带不集中，弥散很严重，是什么原因呢
电泳缓冲液TAE，新配的
以前的条件、体系都没变，跑不出原来的效果了
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1楼 2011-01-04 10:54:17
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lpfxmc

木虫 (初入文坛)
一般情况下，DNA模板放置四度或者常温数月问题都不大，要是更低温度保存可放置更长时间的。不过有可能你在做pcr过程，造成了模板的损伤或者污染。
我们实验室前段时间也遇到了和你一样的情况，我们后来就发现主要是DNA模板出问题了。后来重新更换了DNA模板，就出来了很漂亮的条带。
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13楼2011-01-04 19:54:47
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lpfxmc

木虫 (初入文坛)
★
2207993(金币+1): 2011-01-04 11:12:51
1949stone(金币+1):谢谢交流 2011-01-04 22:28:29
最好附张照片看看。
可以考虑是不是模板放置的时间过长，或者你是否前后用的模板不一致？
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2楼2011-01-04 11:02:21
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lpfxmc

木虫 (初入文坛)
★ ★
dhd997(金币+2):谢谢交流 2011-01-04 12:23:36
2207993(金币+1): 2011-01-04 19:13:45
加样孔中怎么滞留了那么多的样品？确定电泳没有问题？
多做两次PCR,若结果还是这样，则考虑是不是模板放置的时间过长（降解了等等问题）？
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3楼2011-01-04 11:06:33
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2207993

金虫 (小有名气)
做了四五次了，DNA样品重新提取制备了，结果还是这样
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4楼2011-01-04 11:13:48
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