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【求助/交流】PCR后只有模板
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hutingting
银虫
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虫号: 739432
[交流]
【求助/交流】PCR后只有模板
我PCR之后,做酶切,连接,转化,挑了单克隆送测序,发现我P的那段只有模板,没有我要扩展的那几个碱基?这是怎么回事啊?
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2010-12-29 18:48:31
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xuqingchun33
银虫
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虫号: 918005
★
hutingting(金币
+1
):谢谢参与
连接后再做酶切鉴定和PCR鉴定
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9楼
2010-12-31 08:40:25
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xuexue1204
铜虫
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+2
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1949stone(金币+2):谢谢交流 2010-12-29 21:29:32
hutingting(金币+2): 2010-12-30 08:51:08
首先,你的表达好像不太准确,是回收的PCR产物在进行连接,在做后面的实验吧,。你可以咨询下测序公司,看看是哪里出了问题,测序也不是所有的碱基都能准确的测出,也有发生错误的几率
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2楼
2010-12-29 20:46:37
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wangying052
新虫
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hutingting(金币
+2
):谢谢参与
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-12-29 21:29:55
hutingting(金币+1): 2010-12-30 08:51:40
是不是引物的问题,看你的表达好像是问题出在了PCR上。。。
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3楼
2010-12-29 21:23:42
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天龙n部
金虫
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):谢谢参与
hutingting(金币+1): 2010-12-30 08:51:50
你做每一步都做个PCR验证下,就不会出现上述情况了
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5楼
2010-12-29 21:38:30
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