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hutingting

银虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】PCR后只有模板

我PCR之后,做酶切,连接,转化,挑了单克隆送测序,发现我P的那段只有模板,没有我要扩展的那几个碱基?这是怎么回事啊?
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天龙n部

金虫 (小有名气)



hutingting(金币+2):谢谢参与
hutingting(金币+1): 2010-12-30 08:51:50
你做每一步都做个PCR验证下,就不会出现上述情况了
5楼2010-12-29 21:38:30
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xuexue1204

铜虫 (小有名气)


★ ★ ★
hutingting(金币+2):谢谢参与
1949stone(金币+2):谢谢交流 2010-12-29 21:29:32
hutingting(金币+2): 2010-12-30 08:51:08
首先,你的表达好像不太准确,是回收的PCR产物在进行连接,在做后面的实验吧,。你可以咨询下测序公司,看看是哪里出了问题,测序也不是所有的碱基都能准确的测出,也有发生错误的几率
2楼2010-12-29 20:46:37
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wangying052

新虫 (初入文坛)


★ ★
hutingting(金币+2):谢谢参与
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-12-29 21:29:55
hutingting(金币+1): 2010-12-30 08:51:40
是不是引物的问题,看你的表达好像是问题出在了PCR上。。。
3楼2010-12-29 21:23:42
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hfkset

铜虫 (初入文坛)



hutingting(金币+1):谢谢参与
表述不是很清楚啊,发现我P的那段只有模板,没有我要扩展的那几个碱基,是什么意思?
6楼2010-12-30 10:05:41
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