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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR新技术求助 已有7人参与

急求简便易用的PCR新技术。昨晚被指导老师一通狂批,小虫欲哭无泪。说是指导,实际是对这块无暇顾及,如我一般,也没有基础,实验室启用后也极少来,可怜小虫是从实验室开建一路跌跌撞撞,好不容易开始自己的课题。要命的是,实验室就我一个,说话的人都没一个,遇到问题就如这样上网想大家请教。本就是新接触的领域,偏偏又给指定了一个极难的品种,既然是在此向大家求助了,小虫就说说自己的课题方向吧。大学及硕士理论都是药物分析(化学),理论课结束后接受安排到现在的单位协助建立分子实验室,种种原因,历时悠久,轮到品种选定,开始摸索试验条件,时间已然来不及了,延期,目前小虫已在延期中哈。
哦,说到方向,大了来说是研究分子生物学技术在中药鉴定中应用的可行性。具体到品种就是虫草属了。小虫目前做到的就只是对其中的正品和两种伪品进行特异PCR鉴定。什么巢氏之类的,试了一下,空白干扰严重,也不知道相关文献怎么做到的。当然实验内容还有其他挺多的。我们的最终目标就是要将这几个种用分子生物学手段加以区分。
目前实验室具备的条件能进行的就是PCR,普通电泳,连接转化。
样品方面测得了这几个种的ITS序列(有的还需要大量确证),就这样的情况大家能给小虫点建议吗?昨天被批说没有新技术应用,怎么可能通过。本来还想看看酶切结果会不会有差异,这下彻底玩完,这么老的技术,还不给鄙视死了。大家有简单可行的新技术介绍给小虫吗?感激涕零啊。
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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by sunteam02 at 2010-12-27 12:53:42:
定量PCR的新技术:
real-timeimmuno-PCR
高分辨率熔解曲线(HRM)进行SNP基因分型
利用荧光染料法检测单核苷酸多态性(SNP)

非常感谢。Real-time PCR不知道可不可行,其他对我们可能复杂了点。
8楼2010-12-27 12:59:35
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rioarsenal

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1):鼓励交流! 2010-12-27 19:55:23
PCR、酶切这些基本操作,分子生物学的基础啊,是不会过时的
2楼2010-12-27 08:43:06
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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by rioarsenal at 2010-12-27 08:43:06:
PCR、酶切这些基本操作,分子生物学的基础啊,是不会过时的

不是过时,可能是觉得没有新意,论文没有亮点吧。当然我只是小硕。不过之前看到一篇协和的博士论文让我很是诧异,人家做的也不多。就一个RFLP,一个多重PCR,鉴别八种,我真想把这论文给她看看,是不是也狠狠鄙视人家
3楼2010-12-27 09:12:42
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aga0110125

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
silicare(金币+1):有道理 2010-12-27 11:42:24
新意不是在技术上的,是你论文的立题,要真想新技术,就测序咯特别是基因组测,这个最近很热,铺天盖地的广告!

[ Last edited by aga0110125 on 2010-12-27 at 09:53 ]
4楼2010-12-27 09:51:18
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