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zqt123_1981

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】DNA怎么定量?? 已有12人参与

各位在做实验的时候DNA是怎么定量的啊。我先用分光光度计测的DNA浓度,然后根据这个浓度稀释成不同倍数,电泳用λDNA进行比对,为什么同样的浓度两者的亮度不一样啊(比如λDNA20ng,我根据分光光度计测的DNA浓度稀释到20ng)各位有什么好方法吗?因为我想做优化体系的实验DNA确定不准,最后谁知道是多少浓度呢。
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zqt123_1981

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by langduiyue at 2010-12-26 21:46:12:
如果,是优化PCR体系,电泳定量就够了。 我们做PCR一般是用电泳定一下量。模板的量差不多就行。 10微升的体系,我是 12 ng 到  200ng多差不多。  不低一点比较好

为啥我用正交设计优化PCR体系,16个组合只有4个组合有条带啊 没有条带这怎么优化啊?
我用单因素逐一优化的时候,第一个因素优化好了在优化第二个因素的时候跑出来的条带很模糊,这又是怎么回事?难道这该死的体系不想让我优化啊
13楼2010-12-28 10:09:50
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

你后面想做什么实验?
2楼2010-12-26 11:57:45
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poog502

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
推荐使用专门的核算测定仪,较为准确定量。
楼主要做遗传多样性吗?要是,主要还是引物的筛选。

[ Last edited by poog502 on 2010-12-26 at 12:16 ]
3楼2010-12-26 12:14:23
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fjt198719

木虫 (著名写手)

永远的菜鸟


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用微量分光光度计定量啊,只需要1微升就可以了。我们简称核酸蛋白定量仪
独YY不如众YY!!!
4楼2010-12-26 12:25:19
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