24小时热门版块排行榜    

查看: 4197  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

白云恪

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】求GFP转化烟草瞬时表达方法 已有5人参与

各位大虾,最近要把构建的GFP质粒转到烟草中做瞬时表达,不知道具体方法怎么做,谁有这方面的经验,能说说么,最好有具体的转化方法。谢谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白云恪

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by xiaoli8609 at 2010-12-24 17:11:40:
你是要做顺时转染还是稳定表达呀?

瞬时表达啊
7楼2011-01-04 21:45:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

rioarsenal

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+2):鼓励新虫参与~~~ 2010-12-24 14:39:10
引用回帖:
Originally posted by 白云恪 at 2010-12-24 11:01:56:
各位大虾,最近要把构建的GFP质粒转到烟草中做瞬时表达,不知道具体方法怎么做,谁有这方面的经验,能说说么,最好有具体的转化方法。谢谢。

很简单啊。质粒不是有了么,先转化农杆菌,方法和转大肠杆菌近似;选出阳性菌株,摇2-4小时,制成菌液备用。取烟草(最好是无菌苗)嫩叶生汞消毒,剪成小块或打孔,浸入菌液3-5分钟,然后取出叶块,滤纸吸干菌液,置于固体MS培养基表面,暗培养24-72小时。然后取叶块,450nm激发,560nm检测荧光。
2楼2010-12-24 11:34:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白云恪

木虫 (正式写手)

我想知道的是把已经构建好的质粒转进农杆菌之后,在用注射法把农杆菌转进烟草叶的时候用的悬浮农杆菌的液体具体是什么,有的说是MS,10 mM MES medium (pH 5.6), 150 μM acetosyringone,这里就是只含大量微量和铁盐的MS么?其他的两种是不是用MS溶解呢?我想在苗子里做GFP表达,等到转进两天后再采摘叶子在荧光显微镜下观察。这些能说的详细一些么???还有,在做的过程中有什么需要特别注意的那地方么??
3楼2010-12-24 14:31:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rioarsenal

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
MS就行了。

你们实验室连着个操作的基本流程都没有么?
4楼2010-12-24 14:33:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +15 爱看书的可乐 2026-08-26 17/850 2026-08-27 03:31 by xxniao123
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 02:01 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +4 yuleib84 2026-08-26 5/250 2026-08-26 13:40 by yuleib84
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 科研孤儿太难了 +21 我4大白菜 2026-08-20 22/1100 2026-08-26 11:29 by nlgza
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见