应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求GFP转化烟草瞬时表达方法
111/2返回列表12下一页
查看: 4206  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

白云恪

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】求GFP转化烟草瞬时表达方法 已有5人参与

各位大虾，最近要把构建的GFP质粒转到烟草中做瞬时表达，不知道具体方法怎么做，谁有这方面的经验，能说说么，最好有具体的转化方法。谢谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-12-24 11:01:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rioarsenal

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2):鼓励新虫参与~~~ 2010-12-24 14:39:10
引用回帖:
Originally posted by 白云恪 at 2010-12-24 11:01:56:
各位大虾，最近要把构建的GFP质粒转到烟草中做瞬时表达，不知道具体方法怎么做，谁有这方面的经验，能说说么，最好有具体的转化方法。谢谢。

很简单啊。质粒不是有了么，先转化农杆菌，方法和转大肠杆菌近似；选出阳性菌株，摇2-4小时，制成菌液备用。取烟草（最好是无菌苗）嫩叶生汞消毒，剪成小块或打孔，浸入菌液3-5分钟，然后取出叶块，滤纸吸干菌液，置于固体MS培养基表面，暗培养24-72小时。然后取叶块，450nm激发，560nm检测荧光。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-12-24 11:34:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白云恪

木虫 (正式写手)
我想知道的是把已经构建好的质粒转进农杆菌之后，在用注射法把农杆菌转进烟草叶的时候用的悬浮农杆菌的液体具体是什么，有的说是MS，10 mM MES medium （pH 5.6）， 150 μM acetosyringone，这里就是只含大量微量和铁盐的MS么？其他的两种是不是用MS溶解呢？我想在苗子里做GFP表达，等到转进两天后再采摘叶子在荧光显微镜下观察。这些能说的详细一些么？？？还有，在做的过程中有什么需要特别注意的那地方么？？
赞一下 回复此楼
3楼2010-12-24 14:31:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rioarsenal

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
MS就行了。

你们实验室连着个操作的基本流程都没有么？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-12-24 14:33:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoli8609

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你是要做顺时转染还是稳定表达呀？
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-12-24 17:11:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白云恪

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by rioarsenal at 2010-12-24 14:33:10:
MS就行了。

你们实验室连着个操作的基本流程都没有么？

新实验室
回复此楼
6楼2011-01-04 21:44:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白云恪

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xiaoli8609 at 2010-12-24 17:11:40:
你是要做顺时转染还是稳定表达呀？

瞬时表达啊
回复此楼
7楼2011-01-04 21:45:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoli8609

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2011-01-07 21:34:38
引用回帖:
Originally posted by 白云恪 at 2011-01-04 21:45:16:

瞬时表达啊

http://ygty.blogbus.com/logs/16504491.html   去这里看！
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2011-01-07 10:56:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王玉民

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn: 可以重新发帖提问，这样可以增加回复数！ 2011-12-28 12:45:29
wanhscn: 可以重新发帖提问，这样可以增加回复数！ 2011-12-28 12:45:35
各位高手，请问转化中国烟草，哪个品种容易转，有固定成熟的体系吗
赞一下(3人) 回复此楼
心晴
9楼2011-12-28 08:42:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

O啦啦

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主 我也是在做这个 正在查方法 我们实验室之前都没有搞过这个 可以交流一下 分享各自手里查到的资源
赞一下 回复此楼
10楼2016-12-21 17:36:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 白云恪 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-30 22:24 by xiangy672
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 面上意见出来了 +9 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 18/900 2026-08-30 16:47 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 29号明天会评吗 +3 笨笨唐 2026-08-28 3/150 2026-08-30 09:29 by cww8181
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 基金不中，共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭