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pidou213

木虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】荧光定量PCRTm值代表啥意思?

荧光定量PCRTm值代表啥意思?为什么要大于85度才最好呢?请高手指导

再就是溶解曲线前面有小小的峰,那是咋回事?不同模板量小峰不一样,浓度最低的,几乎看不清了
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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)


★
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-27 08:42:50
Tm值和溶解曲线是为了检测PCR反应特异性的,主峰前的一个小峰可能是非特异性扩增,也可能是引物二聚体,可以降低引物浓度试试
3楼2010-12-26 21:45:21
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pidou213

木虫 (正式写手)


为什么没有人回复呢?期待高人啊
2楼2010-12-26 20:35:51
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pidou213

木虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by xiaoyu1014126 at 2010-12-26 21:45:21:
Tm值和溶解曲线是为了检测PCR反应特异性的,主峰前的一个小峰可能是非特异性扩增,也可能是引物二聚体,可以降低引物浓度试试

Tm值多大才好呢?还是没有限制嗯?
4楼2010-12-26 23:55:13
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wangy0908

金虫 (正式写手)


★
pidou213(金币+1):谢谢哦 2010-12-28 01:11:06
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-28 09:07:34
只是说在85左右是最好的。最重要的是你检查一下你的pcr产物是不是特异的吧,如果是特异的,以及是你的目的片段,这个值就不是那么重要了的!
5楼2010-12-27 06:56:30
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