应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】原核表达羊基因，cDNA长度约为3kb，基因为一种有活性的酶
51/1返回列表
查看: 2089  |  回复: 15
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tongxinkxy

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】原核表达羊基因，cDNA长度约为3kb，基因为一种有活性的酶

原核表达羊基因，cDNA长度约为3kb，基因为一种有活性的酶
请问是否原核表达就可以？
请问宿主菌或者其他方面有什么注意事项吗？
在原核表达时有什么注意事项吗？
目的序列已经有了，请问设计引物时，是从哪里开始设计引物呢？
谢谢解答，小女子不胜感激
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼2010-12-20 19:38:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rioarsenal

金虫 (正式写手)
★ ★
dhd997(金币+2):good 2010-12-21 08:29:53
tongxinkxy(金币+2): 2010-12-21 08:43:06
基因长度不是问题，不过翻译后加工很是问题。

E.coli中表达的蛋白质很多都是包涵体，经过一番折腾，纯化后，活性多少都会损失；

你可以用原核试试，如果活性可以，分离容易，就用。不好用的话，就用酵母好了。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-12-21 02:46:33
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
amisking(金币+2):good！ 2010-12-20 20:53:28
tongxinkxy(金币+1): 2010-12-20 23:10:15
一般从编码的第一个氨基酸开始设计引物
原核表达不一定可行的，偏爱密码子不一样，而且真核生物表达后修饰比较多，比如糖基化，原核生物没有这种功能。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-12-20 20:05:33
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tongxinkxy

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2010-12-20 20:05:33:
一般从编码的第一个氨基酸开始设计引物
原核表达不一定可行的，偏爱密码子不一样，而且真核生物表达后修饰比较多，比如糖基化，原核生物没有这种功能。

是不是我确定目的蛋白翻译后加工确定有糖基化过程，就100%不能用原核表达呢？谢谢
赞一下 回复此楼
3楼2010-12-20 20:18:29
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)
tongxinkxy(金币+1): 2010-12-20 23:10:00
tongxinkxy(金币+1):2 2010-12-21 13:55:30
引用回帖:
Originally posted by tongxinkxy at 2010-12-20 20:18:29:

是不是我确定目的蛋白翻译后加工确定有糖基化过程，就100%不能用原核表达呢？谢谢

不光糖基化，翻译后修饰很多种的，都要考虑一下。但是即使需要修饰也不一定不能做原核表达，也许只是活性上有差异而已。看你是要干什么用了，测酶学参数？做抗体？
赞一下 回复此楼
4楼2010-12-20 22:20:38
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭