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xwsooo

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[交流] 【求助/交流】在5'端挂一个尾巴

为了将两对引物扩增后,电泳跑的条带区分开,我想在其中一条引物的5'端挂一段其他物种的序列,但是不知道怎么找这样的序列?

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1楼 2010-12-17 20:25:01

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引用回帖:

Originally posted by ben1147 at 2010-12-17 22:53:01:

这个看你目的片段多大以及跑什么样的胶了。因为引物上虽然可以附加序列，但是毕竟就那么几十bp，如果本身片段好几百上k，跑的是琼脂糖胶的话，附加的这点长度肯定看不出来或者很难分辨。要是本身扩增的条带很 ...

我明白您的意思，重新设计引物我也想过，但是这引物真不好弄到合适的，在primer-blast特异性好的就找到现在这样的了，我的目的产物在140bp 左右，跑琼脂糖凝胶。。。这尾巴的长度应该有所限制吧？怎么样设计才不影响引物本身，又不会使这尾巴与目的序列以外的片断非特异性结合呢？？/