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xwsooo

银虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】在5'端挂一个尾巴

为了将两对引物扩增后,电泳跑的条带区分开,我想在其中一条引物的5'端挂一段其他物种的序列,但是不知道怎么找这样的序列?

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1楼 2010-12-17 20:25:01

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-12-17 23:15:27
xwsooo(金币+1):谢谢啦 2010-12-18 09:42:59

引用回帖:

Originally posted by xwsooo at 2010-12-17 21:25:40:

是这样的,这两对引物扩增的产物大小是一样的,我想在其中一条引物上加个尾巴之类的,已达到在电泳时候在同一泳道上能区分开条带的目的?

这个看你目的片段多大以及跑什么样的胶了。因为引物上虽然可以附加序列，但是毕竟就那么几十bp，如果本身片段好几百上k，跑的是琼脂糖胶的话，附加的这点长度肯定看不出来或者很难分辨。要是本身扩增的条带很短，二、三百左右，引物再长个几十，用PAGE跑应该是能分开的

不知道你要这样分开的目的是什么。如果仅仅是凑巧两对引物扩增产物一样长的话重新设计一下引物，改变其中一对的扩增长度不就行了么。