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【求助/交流】在5'端挂一个尾巴
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银虫
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[交流]
【求助/交流】在5'端挂一个尾巴
为了将两对引物扩增后,电泳跑的条带区分开,我想在其中一条引物的5'端挂一段其他物种的序列,但是不知道怎么找这样的序列?
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1楼
2010-12-17 20:25:01
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银虫
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引用回帖:
Originally posted by
yydopcr
at 2010-12-18 13:05:59:
有点儿问题,第一加了之后引物变长,很容易有不可预测的二聚体和非特异扩增。其次琼脂糖电泳虽然理论可以分开,但是实际操作有难度,聚丙烯酰胺凝胶电泳倒是可以。
如果实验室有条件,建议用real-time吧看meltin ...
您说的是HRM吧?不知道roche的480做这个效果怎么样?sybegreen 或者syto9
是非饱和染料吧?
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14楼
2010-12-18 15:49:27
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神马?看不懂你的问题~~能不能详细解释下实验目的
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2楼
2010-12-17 20:56:44
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yixuanwin
铁杆木虫
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或者我理解的不对, 能不能一次扩增一个引物?
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3楼
2010-12-17 20:58:38
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Originally posted by
yixuanwin
at 2010-12-17 20:58:38:
或者我理解的不对, 能不能一次扩增一个引物?
这个当然是可以的,我只是想优化下,争取一次PCR 加一次电泳 就可以区分开条带...
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4楼
2010-12-17 21:22:59
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