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wwdxx2004

金虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】反敲除

请问FRT位点都是一样的吗?我对我敲除后的菌进行测序发现FRT位点处有一个突变 会不会对反敲除有影响呐 谢谢
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★ ★
scelab(金币+2):谢谢噢~~~你们看的都是nature级的文章,很强大~~~ 2010-12-17 09:53:33
wwdxx2004(金币+1): 2010-12-17 20:54:21
引用回帖:
Originally posted by scelab at 2010-12-17 09:23:56:

对于pCP20和FLP重组酶,没概念
有相关资料介绍下么

Sharan, S. K., L. C. Thomason, et al. (2009). "☆Recombineering: a homologous recombination-based method of genetic engineering." NATURE PROTOCOLS.
Kuhlman, T. E. and E. C. Cox (2010). "☆Site-specific chromosomal integration of large synthetic constructs." Nucleic Acids Res 38(6): e92.
比较经典的是介绍pKD46这个敲除系统的,暂时没找出来。
6楼2010-12-17 09:36:42
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会不会是测序的误差,先反敲除着看看。
2楼2010-12-16 21:25:22
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)


引用回帖:
Originally posted by wwdxx2004 at 2010-12-16 20:27:46:
请问FRT位点都是一样的吗?我对我敲除后的菌进行测序发现FRT位点处有一个突变 会不会对反敲除有影响呐 谢谢

什么叫 反敲除
3楼2010-12-16 21:44:29
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wwdxx2004(金币+1): 2010-12-17 20:54:13
dhd997(金币+1):good 2010-12-18 13:53:13
引用回帖:
Originally posted by scelab at 2010-12-16 21:44:29:

什么叫 反敲除

反敲除,就是转入抗性片段敲除基因后,转入pCP20表达FLP重组酶,利用抗性片段两端的FRT序列将抗性标记删除。
4楼2010-12-17 09:19:24
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