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【求助/交流】反敲除
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wwdxx2004
金虫
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[交流]
【求助/交流】反敲除
请问FRT位点都是一样的吗?我对我敲除后的菌进行测序发现FRT位点处有一个突变 会不会对反敲除有影响呐 谢谢
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2010-12-16 20:27:46
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金虫
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Originally posted by
wwdxx2004
at 2010-12-19 11:12:39:
做了好多次反敲了,都不行,不知道是不是PCP20质粒不行,每次提的PCP20跑胶条带都很弱,转化倒是没什么问题,就是完成不了重组,不知道木虫有什么更好的建议,谢谢!
pCP20质粒,本来浓度就不会很高的,但不会影响转化效率。
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14楼
2010-12-20 09:17:48
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susizheng
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会不会是测序的误差,先反敲除着看看。
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2楼
2010-12-16 21:25:22
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scelab
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Originally posted by
wwdxx2004
at 2010-12-16 20:27:46:
请问FRT位点都是一样的吗?我对我敲除后的菌进行测序发现FRT位点处有一个突变 会不会对反敲除有影响呐 谢谢
什么叫 反敲除
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3楼
2010-12-16 21:44:29
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susizheng
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wwdxx2004(金币+1): 2010-12-17 20:54:13
dhd997(金币+1):good 2010-12-18 13:53:13
引用回帖:
Originally posted by
scelab
at 2010-12-16 21:44:29:
什么叫 反敲除
反敲除,就是转入抗性片段敲除基因后,转入pCP20表达FLP重组酶,利用抗性片段两端的FRT序列将抗性标记删除。
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4楼
2010-12-17 09:19:24
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