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【求助/交流】PCR没有条带 已有8人参与
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大家好，我是个刚做分子的新人，PCR有些还不太明白，请教大家。 最近我跑PCR，两对引物，第一对，一跑就出了目标条带，第二对跑了很多次，死活跑不出东西来。大家帮我分析下，问题可能出在哪里？ 引物设计没问题，很多人都用这对引物。我按照文献的各种方法都跑了，渐变温的，恒温的。开始怀疑引物出问题了，放了很长时间了，但这两天又用新配的引物也还是跑不出来。我也试着改变DNA模板浓度跑了，也没跑出任何东西来。 老板告诉我的信息是，肯定能跑出来，我们试验室毕业了的人跑过，再就是确实不好跑出来，第一对引物比较好跑出来，第一对跑出来了但第二对引物不一定能跑出来。他的意思是不是DNA模板可能有问题？纯度不够？ 大家帮我分析下，我的实验过程中可能哪些地方出了问题，该怎么解决这些问题，谢谢了！  这是第一对引物跑的图  这是第二对引物跑的，跑出应该是同第一对的差不多，都应该是300多bp的片段 （另外弱弱的问一下，最下面那条带是什么？引物？引物二聚体？） 谢谢大家了！ [ Last edited by napzy on 2010-12-16 at 18:49 ] |
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7楼2010-12-17 19:48:25
starseacow
专家顾问 (职业作家)
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2楼2010-12-16 19:02:33
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4楼2010-12-16 20:25:25
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