应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】HRM技术的几个问题
51/1返回列表
查看: 3141  |  回复: 23
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xwsooo

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】HRM技术的几个问题

我搜索了些HRM的资料看,现在还有些不明白的地方:
1。溶解曲线的差异是根据碱基含量的不同，那么就要求个样品的DNA含量一致才不会影响结果，我提取的是外周血DNA，那么如何保证DNA含量的一致呢？
2。对于一对引物，需不需要要求T m值差异要大些？引物是不是和普通PCR 的引物一样呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2010-12-15 16:13:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

欧朵拉

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
944645楼: Originally posted by hfkset at 2010-12-15 17:19:46
ＨＲＭ要求ＤＮＡ浓度一样，但也不用太精确，跑胶看着差不多就行，引物和普通ＰＣＲ引物一样，不用特殊的。至于成本，染料比较贵，１０００ｕｌ，１３００ＲＭＢ

DNA的浓度有怎样的要求，是在一个数量级上就可以吗？
赞一下 回复此楼
16楼2012-12-17 23:09:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答

silicare

荣誉版主 (文坛精英)
看晕我了，没看明白你的意思
赞一下 回复此楼
2楼2010-12-15 16:22:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xwsooo

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-12-15 16:22:36:
看晕我了，没看明白你的意思

不好意思，我现在先自我解释一下 ，首先HRM技术的精确性受到不同标本中DNA浓度的影响，所以必须先保证DNA 浓度的一致，方法有，用紫外分光光度计测量吸光度，用TE稀释至1.0.
第二，与两条引物的tm差应该无关吧。但我还不明白的是HRM需不需要设计特异性引物，有别于普通PCR引物设计的那种？？/
最后都说HRM成本低，那我想了解如果做500份标本，那么大概要花多少RMB?
赞一下 回复此楼
3楼2010-12-15 17:03:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)
引用回帖:
Originally posted by xwsooo at 2010-12-15 16:13:25:

我提取的是外周血DNA，那么如何保证DNA含量的一致呢？
  

上边这句话啥意思
赞一下 回复此楼
4楼2010-12-15 17:09:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭