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【求助/交流】大家看看这对引物(高G+C含量)的退火温度设多少合适
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clearth
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[交流]
【求助/交流】大家看看这对引物(高G+C含量)的退火温度设多少合适
真菌通用引物:(做DGGE分析的,因此GCfung含GC夹)
NS1: 5′-GTAGTCATATGCTTGTCTC-3′
GCfung: 5′-
CGCCCGCCGCGCCCCGCGCCCGGCCCGCCGCCCCCGCCCC
ATTCCCCGTTACCCGTTG-3′
上海生工合成的引物,报告单显示:
NS1的Tm=53.25℃,GC=42.11%
GCfung的Tm=89.02℃,GC=86.21%
GCfung不带“GC夹”的Tm=57.3℃,GC=55.56%
麻烦大家看看这对引物(高G+C含量)的退火温度设多少合适?谢谢啊
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2010-12-11 20:01:00
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clearth
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引用回帖:
Originally posted by
rainwander
at 2010-12-12 13:56:12:
不算GC夹,Tm-5左右
两个引物的Tm相加除以2再减去5度,就是吗?
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8楼
2010-12-12 20:00:48
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scelab
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★
clearth(金币
+1
):谢谢参与
GC好多啊
不懂,帮顶
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2楼
2010-12-11 23:23:42
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bigboy123
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★
clearth(金币
+1
):谢谢参与
兄弟你玩的太高难了!不过建议你一开始先当那个发夹不存在,做做试试,应该没什么问题。哪个GCfung可以多加点,只要出点带,后面就好办。
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3楼
2010-12-12 10:04:41
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clearth
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大家都来帮帮忙啊
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4楼
2010-12-12 10:05:18
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