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宝宝1986

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助】邻二氮菲测清除羟基自由基的能力 已有10人参与

我要测一种物质的清除羟基自由基的能力,采用的是邻二氮菲法 ,但是加入样品,37摄氏度保温1h后,出现了絮状沉淀!!!!!!!取上清液测吸光度跟摇匀后测吸光度差别很大,而不加样品的对照组却没有出现絮状沉淀。,请问一下这是怎么回事?急急急~谢谢
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熊云霞

铜虫 (初入文坛)

★ ★
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lovibond(金币+1): 鼓励新虫发帖 2011-10-27 10:42:16
我也测的酚类,结果出现和楼主一样的情况,有红色絮状沉淀。但是震荡后,沉淀消失。测吸光度,清除率是正的。我把样品浓度调低,尽管没有沉淀产生,但是清除率为负的。我想问一下楼主,配样是用什么配的?我用的是无水乙醇配样,空白用无水乙醇。反应体系是7.5mM邻二氮菲溶液1ml,0.05M pH7.4 磷酸缓冲液2ml,样品(空白)1ml,7.5mM硫酸亚铁溶液1ml,0.1% H2O2  1m,加水补至10ml。未损管的双氧水用超纯水代替。我用这种方法测了维生素C的羟基清除率,效果还是很好的,测这种酚类物质不知道问题出在哪里?可以交流一下。
11楼2011-10-27 09:09:19
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huangxing45

金虫 (正式写手)

★ ★
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树树8013(金币+1):谢谢huangxing45虫友的解答 2010-12-10 16:22:12
我做的时候也是出现了这种情况。我的解释是,我的样品中酚类物质比较多,酚类物质跟反应中产生的三价铁离子产生了黑色的絮状物。
2楼2010-12-10 16:20:01
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huangxing45

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我当时做了几个样品,其中酚类较高的出现了絮状物,做的数据也不可信。
3楼2010-12-10 16:27:07
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柚柚海风

金虫 (正式写手)


lovibond(金币+1):鼓励交流 2010-12-11 22:23:14
我们都是水浴后离心,然后再测得,邻二氮菲法好像不是很好,有钱的话就用DPPH或者FRAP法测总抗氧化能力吧。
4楼2010-12-11 22:21:19
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