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[交流]
【求助/交流】DNA 复性的问题
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“2.复性 变性DNA在适当条件下，两条互补链可重新恢复天然的双螺旋构象，这种现象称为复性。热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程也叫退火，一般认为，比Tm值低 25℃ 的温度是DNA复性的最佳条件。 ” DNA的复性 ，我现在有两条DNA链，a和b，它们是完全互补配对的，我怎么做才能是他两个变为双链DNA呢， 我的DNA链是 每条，是共10个碱基，其中一半是GC,一半是AT的 谢谢谢谢谢！ |
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rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2010-12-09 21:24:19
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2010-12-09 21:24:19
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http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=103538047q3swbliu2ibaw0u LZ可以看看这个资料里面的“使用说明”部分，就知道如何由互补的oligo DNA合成出双链DNA了~~~ |
4楼2010-12-09 20:55:45
2楼2010-12-09 20:50:14
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Synthesis of dDNA with Oligo DNA V(H2O)= OD(number)*33*20000/Oligo molecular weight (unit: ul) Oligo DNA-A: 100uM VH2O=nmolx10=91ul Oligo DNA-B: 100uM VH2O=91ul Annealing reaction system preparation Nuclear free water: 40ul Annealing buffer for DNA Oligo(5x): 20ul Oligo DNA-A(100uM): 20ul Oligo DNA-B(100uM): 20ul Total volume: 100ul dDNA concentration: 20uM/10uM Annealing reaction procedure using PCR Procedure Temperature(℃) Time(min) specification 1 95 2 Oligo denatured 2 0.1℃/8s-25℃ or 1℃/90s-25℃ Approximate 90 Annealing 3 4 long time Temperature storage |
3楼2010-12-09 20:52:18
5楼2011-09-01 13:54:45