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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR拖尾
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精精

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR拖尾 已有10人参与

我用细菌338，518扩细菌V3区，以土壤DNA为模板，退火温度61度，延伸20S，结果出来目的片段挺亮的，但是条带拖尾很严重，请教各位大虾这个该如何优化？
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少才微善
1楼 2010-12-07 21:06:29
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waiwaidou_1983

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2011-01-15 01:43:14
引用回帖:
Originally posted by 精精 at 2011-01-12 17:21:55:


好的，高保真酶一般是指pfu酶吗？

保真性递增：Taqmix  rTaq ExTaq pfu

推荐rTaq 针对你的实验
赞一下(2人) 回复此楼
14楼2011-01-12 19:30:05
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孙盛楠

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-09 20:18:42
引用回帖:
Originally posted by 精精 at 2010-12-07 21:06:29:
我用细菌338，518扩细菌V3区，以土壤DNA为模板，退火温度61度，延伸20S，结果出来目的片段挺亮的，但是条带拖尾很严重，请教各位大虾这个该如何优化？

个人认为：样品溶解不均匀，存在降解。还可以将胶做薄些，电压低些，慢跑看效果。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-12-08 10:44:26
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精精

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 孙盛楠 at 2010-12-08 10:44:26:


个人认为：样品溶解不均匀，存在降解。还可以将胶做薄些，电压低些，慢跑看效果。

谢谢楼上的，楼上说的很有道理~~我同样的样品，换个人批就没有拖尾，换块胶拖尾程度也不一样
赞一下 回复此楼
少才微善
3楼2010-12-09 20:00:21
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tsq0126

金虫 (小有名气)

是不是这样的图啊，我和你做的是一样的

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励上图 2010-12-11 13:58:39
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-12-11 12:17:50
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