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lwfangel

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】大肠杆菌菌液,如何再扩增?已有5人参与

用大肠杆菌做克隆,挑好白色单菌落之后,放到1mlAmp抗性的LB培养基中,摇菌,浑浊后做菌液PCR。对于有克隆产物的菌液,我怎样才能得到更多的菌液呢?

我想将有克隆产物的菌液吸取10ul,加到1mlAmp抗性的LB培养基中,摇菌,这样做是否合理?我这样做了之后,再做PCR去没有产物条带,不知道是什么原因?

还有我做的菌液PCR在第二次,点样跑胶时,去没有条带了,又是怎么回事?菌液PCR产物很不稳定吗?
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不鸣鸟

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
615234楼: Originally posted by ben1147 at 2010-12-06 14:14:10
在无污染的情况下是可以用菌液继续培养的
保险起见还是先用菌液划线或者稀释之后涂板子挑单克隆再摇
菌落PCR一般都是假阳性多,假阴性很少见到。是不是菌沉下去了,吸上清里没多少菌所以P不出来?
PCR产物不应该 ...

请问,用AMP平板筛选出的单菌落,PCR检测并划线,是应该继续划在含AMP还是不含AMP的LB平板上
13楼2012-08-12 10:08:23
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