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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】用硫酸铵盐析到饱和度90%了，酶活还是在上清液里，求助各位虫友！
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leewolf

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by liyang003 at 2010-12-08 10:23:54:
先要调pH吧，调到等电点附近，比较好沉淀，这一点文献上基本上不讲的。

我看盐析理论的时候有这么说过，你做过吗？可行吗？是的，好多文献都没有说这个的，我问了我们这边有些同学他们盐析时都没调pH值？
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11楼2010-12-08 22:10:03
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liyang003

金虫 (小有名气)
★
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做过，我提一种蛋白酶，等电4.6，我通常调到6.0左右再进行乙醇或丙酮的分级沉淀，效果很好。
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12楼2010-12-09 11:06:49
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silicare

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如果你的是重组蛋白这个就好解释了
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13楼2010-12-09 16:08:06
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leewolf

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-12-09 16:08:06:
如果你的是重组蛋白这个就好解释了

不是。。。。
但还是好奇的问问为什么是重组蛋白就好解释呢？谢谢
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14楼2010-12-09 21:42:32
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silicare

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dhd997(金币+1):鼓励回帖交流 2010-12-10 09:11:21
引用回帖:
Originally posted by leewolf at 2010-12-09 20:42:32:

不是。。。。
但还是好奇的问问为什么是重组蛋白就好解释呢？谢谢

因为重组蛋白往往都会带上一个很大的标签啊
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15楼2010-12-10 08:11:48
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)
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转速有没有可能不够啊，离心离不下来，我做的蛋白就需要高一点的转速才可以的！
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I am not a hero , but I served with heroes！
16楼2010-12-10 11:21:41
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)
★
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我一般用10000g  20min.硫铵不行可以试丙酮沉淀，乙醇沉淀。祝好运
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17楼2010-12-10 15:10:47
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leewolf

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wlt728 at 2010-12-10 11:21:41:
转速有没有可能不够啊，离心离不下来，我做的蛋白就需要高一点的转速才可以的！

谢谢！
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18楼2010-12-10 22:30:04
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leewolf

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yuanbo934 at 2010-12-10 15:10:47:
我一般用10000g  20min.硫铵不行可以试丙酮沉淀，乙醇沉淀。祝好运

谢谢你！
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19楼2010-12-10 22:30:49
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dangjn

禁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
本帖内容被屏蔽
20楼2010-12-11 10:31:53
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