应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 【求助】关于神经元的western所遇到的问题
51/1返回列表
查看: 2361  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

huangwensh

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助】关于神经元的western所遇到的问题

各位，我是用新生大鼠海马神经元加药后提蛋白做western，但是做了6次始终不成功，三次是根本看不见荧光，还有两次是整张pvdf膜都发光，还有一次是膜的中间一片发光，其他地方不发光，是怎么回事呀、、？？是不是蛋白提的不好啊？？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-11-30 20:24:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou213

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by huangwensh at 2011-01-13 12:47:48:


取小块膜,放到24孔板中(PVDF先有甲醇泡,烘干),滴上不同浓度的蛋白(先加5UL,37度烘干,再加5UL,烘干),加封闭液,室温,摇床一小时, 洗去. 加不同浓度一抗,2-3小时, 室温,摇床.洗膜液洗3次,每次10分钟.不同浓度二抗 ...

“按这个方法试试”不是成熟的方法吗？
赞一下 回复此楼
13楼2011-01-14 22:50:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

kno3

捐助贵宾 (著名写手)
★
huangwensh(金币+1): 2010-12-02 10:40:17
qinhy(金币+1):多谢指教，欢迎常来药学版！ 2010-12-03 21:39:07
先用现有的条件做下预实验呢？确定不是你自己操作的问题，或是东西没配好之类的问题。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-12-02 00:24:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou213

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by huangwensh at 2010-11-30 20:24:43:
各位，我是用新生大鼠海马神经元加药后提蛋白做western，但是做了6次始终不成功，三次是根本看不见荧光，还有两次是整张pvdf膜都发光，还有一次是膜的中间一片发光，其他地方不发光，是怎么回事呀、、？？是不是蛋 ...

请问发光的时候是什么感觉呢？
赞一下 回复此楼
3楼2011-01-10 08:59:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangwensh

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by pidou213 at 2011-01-10 08:59:38:



请问发光的时候是什么感觉呢？

加上ECL的时候在红光灯下就能看到光，关了关了红光灯，会很亮，但是很快就崔灭了也就5分钟吧，还有两次是关了灯以后光慢慢出现的，等了半分钟才有光，但是崔灭的时间也很短，很亮的光，
赞一下 回复此楼
4楼2011-01-10 11:08:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+3 Tsingking1 2026-08-27 14/700 2026-09-01 08:29 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭