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青枫林

金虫 (正式写手)


[交流] 【交流】脂质体 制备、粒径、混浊、沉淀等问题

本人现在做脂质体遇到一系列的问题: 首先薄膜分散法制备,高压匀质,
1、之前做脂质体时水化不完全,随后加大了胆酸钠的浓度,水化很完全,且水化后挺透明澄清的,过高压匀质(800bar)后问题出现了:
   a、匀质时间2min、4min、6min取样,2min、4min的澄清,但是6min变混浊,原因是什么?是匀质长时间温度变高了让其破乳了?还是匀质压力大使药物或辅料析出了?
   b、2min、4min、6min取样后放置冷却,都不同程度变的混浊,其中6min最混,这是什么原因?是不稳定让其破乳了吗?
  
2、我将2min的一部分进行55摄氏度的加热,有絮状的混浊出现,较易过0.2微米的水系膜,而不加热的2min以及4min、6min的均较难过0.2微米的水系膜。这是为什么?是加热破乳了吗?但是又没有完全破乳,只是稍变混浊?脂质体本身是应该易过滤膜还是难过滤膜?
3、我制备了一些其他的脂质体,高压匀质后都有不同程度的混浊,放置后有沉淀析出, 网上说是卵磷脂的相变温度造成的,可以用蛋白卵磷脂,不知道大家用蛋白卵磷脂的有没有这情况,还有说加PEG-DSPE可以解决的?不知道有没有用过的?
沉淀的上层澄清且乳光带蓝色,较易过滤膜,那么上层是不是脂质体?
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青枫林

金虫 (正式写手)


自己顶起
2楼2010-12-01 09:30:42
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lianfenggood

金虫 (小有名气)



karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-01-29 18:06:05
a、匀质时间2min、4min、6min取样,2min、4min的澄清,但是6min变混浊,原因是什么?是匀质长时间温度变高了让其破乳了?还是匀质压力大使药物或辅料析出了?
   b、2min、4min、6min取样后放置冷却,都不同程度变的混浊,其中6min最混,这是什么原因?是不稳定让其破乳了吗?

高压匀质属于机械力减小粒径,破坏了脂质体的结构,所以药物析出,正常。随着剪切时间的延长,破坏力增大,所以6min中的稳定性要差于2min,4min;

、我将2min的一部分进行55摄氏度的加热,有絮状的混浊出现,较易过0.2微米的水系膜,而不加热的2min以及4min、6min的均较难过0.2微米的水系膜。这是为什么?是加热破乳了吗?但是又没有完全破乳,只是稍变混浊?脂质体本身是应该易过滤膜还是难过滤膜?

你用的是不是HSPC,如果是的话,这个也是正常现象,55高于HSPC玻璃化温度,脂质体柔性增大,易于过0.2umPES膜;不加热脂质体属于晶态,柔性差,不易过滤;
3楼2011-01-28 19:13:20
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fortuity

木虫 (小有名气)


青枫林(金币+2): 2011-07-21 12:44:11
1.高压均质肯定是对脂质体的结构和稳定性是有影响的,相比之下挤出的方法更柔和,更合适。
2.脂质体本身是很难过滤的,粒径偏大的更甚,温度高于相变点时,膜流动及柔韧性增加,更易过膜,但仍属于难以过滤的范畴,结合一定的高压,有所改善。
3.你说的蛋白卵磷脂应该是蛋黄卵磷脂吧,氢化大豆卵磷脂和氢化蛋黄卵磷脂本身的性质还是有蛮大的区别的,氢化大豆卵磷脂更适宜做脂质体,而氢化蛋黄卵磷脂更适宜的载气脂质微泡的制备。
4楼2011-02-17 08:27:11
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悠悠子瞻

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
过滤膜,是怎么过的呢?是那种仪器么?我们实验室没有,我想用那种注射器过滤膜头的那种方法,不知到能不能用?
5楼2012-12-17 10:37:22
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1196782296

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by lianfenggood at 2011-01-28 19:13:20
a、匀质时间2min、4min、6min取样,2min、4min的澄清,但是6min变混浊,原因是什么?是匀质长时间温度变高了让其破乳了?还是匀质压力大使药物或辅料析出了?
   b、2min、4min、6min取样后放置冷却,都不同程度变 ...

我用的是hspc 现在做空白脂质体 超声完是牛奶差不多的 但一两个小时后就有沉淀了 晃动一下 就有成牛奶的样子了 这是什么原因啊  是不是磷脂浓度大的原因啊
6楼2015-03-20 14:32:42
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lafee

铜虫 (初入文坛)


怀疑浓度太大
7楼2015-05-30 20:47:36
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