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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】HPLC检测黄酮的问题
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陈陈小颖子

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC检测黄酮的问题

各位虫子们好！我最近在检测某植物的总黄酮提取液，刚开始摸索条件时都好好的，几种成分分离都还可以，图如下（主要是我框起来的那几个峰）：
四天后，同样的柱子，同样的流动相，总之就是所有条件不变，可是图像就成下面这样了:.难道是我的柱子柱效降低了吗？可是这根柱子就我一个人用过，才进样30次左右啊.....很是郁闷，请各位虫子们帮我分析分析原因，能提供解决办法就更好了！感谢大家了！最后，祝还在做实验的虫子实验顺利，已经毕业工作了的工作顺利，总之一切顺利，不要郁闷！（事事不顺真的难受，我现在就这样.....)

[ Last edited by 陈陈小颖子 on 2010-11-26 at 20:02 ]
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1楼 2010-11-26 19:56:46
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古可ぷ

荣誉版主 (文坛精英)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
karl2100(金币+1): 多谢提供！ 2011-08-09 23:01:40
我觉得是柱子不够干净，冲柱的时候最好慢慢降低极性冲洗，因为柱子会因为有机溶剂收缩而导致冲不干净。
黄酮的话应该用70%甲醇做流动相，然后在慢慢降低甲醇的比例就行了吧，大概十几分钟就搞定了
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14楼2011-08-09 17:59:32
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heyugudu

银虫 (正式写手)
陈陈小颖子(金币+2):我之前就确定好方法了，改变流动相基本不现实了 2010-11-27 21:27:50
我们最近也出现这种问题了，你确定流动相的比例没有变化么？如果是摸索试验的话，建议你换种流动相试一下．
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2楼2010-11-27 16:38:58
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drugmen

金虫 (正式写手)
陈陈小颖子(金币+2):梯度洗脱，安捷伦的柱子，最开始的10多次进样图形都是很好的，使用了柱温箱，每次使用完都会用95%水甲醇冲洗100分钟，因为我的流动相里面有冰醋酸 2010-11-27 21:31:10
什么方法？走梯度还是走等度？流动相是什么？比例？使用什么类型的色谱柱？是否使用柱温箱？每次实验结束后如何清洗色谱柱？
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3楼2010-11-27 18:04:46
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znmznm

金虫 (小有名气)
★
陈陈小颖子(金币+2):我的流动相每天都是现配的..... 2010-11-27 21:32:10
qinhy(金币+1):多谢指教，欢迎常来药学版！ 2010-11-29 09:58:56
可能是柱子清洗的问题，也有可能流动相需要重新制备
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4楼2010-11-27 19:00:18
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