24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

bigbangrex

铁杆木虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 8766.4
帖子: 209
在线: 99.8小时
虫号: 854634

[交流] 【求助/交流】极小分子与极大分子蛋白的Western Bloting转膜求助！

如题，我最近想做6kd，7.5kd和300kd的三个蛋白western，查阅了文献说小分子要用三甲基甘氨酸体系电泳，0.2um的膜，跑了电泳但是总是转不出来，还有那个大分子蛋白，也老是转不出来，老板怒了，急死我了。
我实验室是六一仪器厂的湿转体系，请问有没有高手指点一下两种极端蛋白的转膜时间或注意事项条件什么的，谢谢了！

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

westernblot PVDF膜甲醇浸泡时间已经有14人回复
western的转膜液配方已经有6人回复
western bloting转印求教已经有16人回复
蛋白质同源模建求助！已经有6人回复
急！500kD 蛋白western 求助已经有17人回复
BDNF的转膜条件（湿转）已经有3人回复
怎么区分小分子还是大分子已经有6人回复
EGFR western蛋白两条带已经有5人回复
western目的蛋白发生漂移已经有7人回复
小分子蛋白的western blotting注意事项已经有12人回复
求助EGFP蛋白的western及免疫荧光问题！！！！！急急急！！！！！已经有4人回复
组蛋白转膜技术已经有3人回复
细胞提取蛋白，做western blotting，怎么知道是提取总蛋白还是膜蛋白呢？已经有4人回复
western转膜最近总是转过，大家帮忙分析下原因哈已经有22人回复
western 转膜不均匀什么原因已经有7人回复
请教蛋白质之类的大分子模拟入门建议。。。已经有6人回复
western bloting 凝胶成像系统使用调查已经有72人回复
求助western mark 转膜不全，急！已经有7人回复
western bloting 短路的疑问已经有7人回复
求适合western bloting的提取植物组织蛋白提取方法已经有12人回复
western转膜问题已经有8人回复
求助，如何使用Forster能量转移理论计算药物小分子与蛋白之间的能量转移啊？已经有11人回复
求助Western-bot转膜问题已经有25人回复
【求助/交流】转膜已经有15人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2010-11-25 20:50:34

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

huangwensh

木虫 (著名写手)

应助: 12 (小学生)
金币: 3796.5
帖子: 1693
在线: 238.6小时
虫号: 1031642

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

1988604楼: Originally posted by 798250242 at 2013-03-28 18:57:42
请问，转膜液的配方，我在做一个260kb的大分子，做了几次western blotting没做出结果，我们实验室的转膜液没加sds，今天看到您的贴，想学习下你们的转膜液配法，能分享下吗？发我的邮箱也行，798250242...

甘氨酸2.9g，tris5.8g,SDS0.37g，配成800ml.用的时候加20%的甲醇就行了。