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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 性能应用 » 【请教】叶酸标记量子点细胞成像
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custardchen

金虫 (小有名气)
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Originally posted by cln444391713 at 2010-11-23 14:12:13:
我想做叶酸标记量子点，用的很传统的方法，但是老标记不上，能告诉我原因在哪吗？
qds5ml+25vlDCC+25vlNHS(都为0.05molDMSO的溶液)室温搅拌30min ,25vl叶酸（避光搅拌过夜），透析3-4h
测了DLS 但标记前后 粒子 ...

想请教楼主您量子点与叶酸偶合上了吗，叶酸是不是对量子点的荧光淬灭的比较严重啊
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21楼2011-03-16 10:27:42
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liuanan

专家顾问 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
直接买表面羧基的量子点。
用PEI包裹赋予氨基有问题，可能会团聚，变颜色，这种情况要调整pH值，使氨基或羧基电中性
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22楼2011-03-16 11:44:48
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wanlong

至尊木虫 (著名写手)
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203338楼: Originally posted by euroho at 2010-11-24 10:19:58
你可以买表面羧基修饰的量子点，然后用PEI包覆一层，这样就得到了楼上所说的表面带有氨基的量子点，然后再接叶酸上去。注意一点哦，叶酸有2个羧基，其中只有一个较长链的羧基是可以反应的。不然的话会破坏叶酸和细胞 ...

你的意思是，叶酸受体内吞叶酸是通过羧基进行介导的？
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everyday开心
23楼2012-06-07 11:31:38
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柳下戏昙

银虫 (小有名气)
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直接合成带氨基的量子点多简单，然后连接叶酸，最后超滤出去小分子，再检测看看结果
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24楼2012-09-26 15:16:20
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cln444391713

银虫 (小有名气)
引用回帖:
1978239楼: Originally posted by 柳下戏昙 at 2012-09-26 15:16:20
直接合成带氨基的量子点多简单，然后连接叶酸，最后超滤出去小分子，再检测看看结果

哈 偶已经连上啦 用的EDC与NHS 细胞成像效果很好
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25楼2012-09-28 13:13:11
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cln444391713

银虫 (小有名气)
引用回帖:
1868366楼: Originally posted by custardchen at 2011-03-16 10:27:42
想请教楼主您量子点与叶酸偶合上了吗，叶酸是不是对量子点的荧光淬灭的比较严重啊...

已经连上，是啊 所以叶酸得适量
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26楼2012-09-28 13:14:24
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w408912472

木虫 (正式写手)
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1978346楼: Originally posted by cln444391713 at 2012-09-28 13:13:11
哈 偶已经连上啦 用的EDC与NHS 细胞成像效果很好...

能否具体讲讲你的方法，以及药品用量
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27楼2013-03-01 20:43:37
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lmx080501

铁虫 (初入文坛)
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26楼: Originally posted by cln444391713 at 2012-09-28 13:14:24
已经连上，是啊 所以叶酸得适量...

楼主您好，最近也在连接叶酸，但是连了几次，量子点荧光都消失了，具体方法如下：5ml QD(0.1mg/ml) 加 50ul EDC、50ul NHS(0.05M PBS) 搅拌30min，加50ul叶酸（0.05M DMSO溶液）。加入叶酸以后荧光明显下降，搅拌几个小时后，荧光就消失了。请教一下，您在连接的时候有什么主意事项吗？
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28楼2014-08-05 15:32:19
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莫莫冰红茶

银虫 (初入文坛)
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9楼: Originally posted by qingbo62 at 2010-12-04 12:19:43
按照我的理解，你这个方法：
1、是利用QD上面的COOH与叶酸的NH2反应？？
2、一步法？过量的DCC与NHS不除去吗？

如果是这样，我觉得就有问题了。...

最后透析不是为了除去未参加反应的物质么。。。我看到一篇文献上用的和楼主一样的方法，，，我也想做这个，，不知道这个方法行不行啊？？
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29楼2014-10-09 17:16:54
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莫莫冰红茶

银虫 (初入文坛)
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4楼: Originally posted by euroho at 2010-11-24 10:19:58
你可以买表面羧基修饰的量子点，然后用PEI包覆一层，这样就得到了楼上所说的表面带有氨基的量子点，然后再接叶酸上去。注意一点哦，叶酸有2个羧基，其中只有一个较长链的羧基是可以反应的。不然的话会破坏叶酸和细胞 ...

这个方法应该是活化了量子点表面的羧基跟叶酸的氨基反应吧，，，如果是跟叶酸的羧基反应的话不应该是叶酸加EDC和NHS么？
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30楼2014-10-09 17:19:24
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