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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】trizol 提ＲＮＡ中的一些问题
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oditors

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】trizol 提ＲＮＡ中的一些问题 已有17人参与

小弟要用Trizol提RNA，但是一直都提不好。查一些资料，总结出下面一下问题，希望大虾们给我解说一下！！！
1、提RNA过程中，那个异丙醇的量以什么为标准？我现在是定500ul。异丙醇需要预冷吗？常温下用影响大吗？我一直都是常温提的。
2、洗涤沉淀后，在空气干燥时，一般干燥多久啊？我有试过30分钟，也试过几分钟，但是最后复溶的效果都不好，浓度都偏低，而且30分钟时，原来明显的白色沉淀会溶解不见。
3、我提RNA的浓度一直都不好，有什么办法能够把浓度提上去啊！
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1楼 2010-11-23 16:41:33
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dingxiuying

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1、研磨前样品量要够，但不能太多。研磨要充分，成粉末最好。研磨时样品要始终保持在冷冻状态。
2、最后倒掉70%乙醇后，用无水乙醇再洗一次，然后干燥速度就会很快。
3、如果过于干燥，溶解的时间就要相应加长一些。
4、多做多想。
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我喜欢默默地被你注视默默地注视着你，我喜欢深深地被你爱着深深地爱着你
22楼2011-03-07 16:01:06
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2010-11-23 18:36:07
1..异丙醇需要预冷,你应该知道为什么，冷的才容易沉淀~
2。不要过度干燥，和DNA一样，太干了不容易溶解
3。上面两点做好了，你浓度就上去了~
祝 你成功！
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2楼2010-11-23 17:32:58
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢补充 2010-11-23 18:37:51
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-11-23 17:32:58:
1..异丙醇需要预冷,你应该知道为什么，冷的才容易沉淀~
2。不要过度干燥，和DNA一样，太干了不容易溶解
3。上面两点做好了，你浓度就上去了~
祝 你成功！

如果浓度偏低，出去提取的量有点少以外，还有可能污染了RNase，导致RNA的降解造成的。所以在整个操作过程中应该避免污染，防止皮肤和空气颗粒上的RNase污染。
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
3楼2010-11-23 18:02:19
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tiani_tan

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
浓度低与你溶解的量有关，
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4楼2010-11-23 20:41:08
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