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oditors

银虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】trizol 提ＲＮＡ中的一些问题已有17人参与

小弟要用Trizol提RNA，但是一直都提不好。查一些资料，总结出下面一下问题，希望大虾们给我解说一下！！！
1、提RNA过程中，那个异丙醇的量以什么为标准？我现在是定500ul。异丙醇需要预冷吗？常温下用影响大吗？我一直都是常温提的。
2、洗涤沉淀后，在空气干燥时，一般干燥多久啊？我有试过30分钟，也试过几分钟，但是最后复溶的效果都不好，浓度都偏低，而且30分钟时，原来明显的白色沉淀会溶解不见。
3、我提RNA的浓度一直都不好，有什么办法能够把浓度提上去啊！

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1楼 2010-11-23 16:41:33

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

ymjxl123

木虫 (著名写手)

风清扬

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★
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引用回帖:

Originally posted by lixg at 2010-11-26 08:44:38:
TRIZOL法提取总RNA
（改进的一步法）

Trizol中含苯酚和异硫氰酸胍，可保护RNA免受RNase的污染。

1. 在1.5 ml的EP管中加入1ml的Trizol。
2. 称取约100 mg的材料，在液氮中研磨，转至上述EP管中。（材料体 ...

你好，我想向你请教一下：
氯仿的加入是在将trizol-样品粗液高速离心后加入还是在trizol-样品粗液充分混匀并静置一段时间后直接加入好呢？