24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 1181  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

木一木一

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】半定量PCR已有5人参与

求助各位:做半定量PCR,扩增actin基因跑电泳时,出现两条带,一条为所需的条带,在其下面还有一条带,是什么原因呢?
多谢多谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

exon2002

铁杆木虫 (著名写手)

1、优化PCR条件,减少非特异扩增。
2、跑电泳之前,把PCR产物预热(80度)5分钟。
5楼2010-11-23 06:35:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

zhaoxianfeng

金虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2010-11-22 10:44:41
是因为在反转CDNA的时候加的酶的原因,出现两个条带,有的酶就只有一个条带,不过你剪下你需要的就可以了
2楼2010-11-22 09:13:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaoxianfeng

金虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk:建议在原帖上编辑~~按帖子下方的编辑按钮即可~· 2010-11-22 17:58:46
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2010-11-22 10:44:41

是因为在反转CDNA的时候加的酶的原因,出现两个条带,有的酶就只有一个条带,不过你剪下你需要的就可以了
本文来自: 小木虫论坛 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2619291
不对,上面写错了,是加的引物的问题,错写成酶了,对不起了!
3楼2010-11-22 17:22:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

littlehong

木虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+3):鼓励新虫!欢迎多来交流!:tiger06: 2010-11-22 23:06:02
半定量PCR只需要看你的目标条带就好,下面的带有可能是杂带,也有可能是引物二聚体
如果引物足够好,可以直接用Real-time PCR检测就好
4楼2010-11-22 19:42:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见