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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】谁会gene waling操作？能不能发一份完整的实验步骤、
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zhangw

银虫 (小有名气)
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134101楼: Originally posted by scienzyme at 2010-11-22 10:27:02:
我找了几篇文献，包括了SiteFinding PCR, Inverse PCR, Panhandle PCR,TAIL PCR等PCR walkin技术。
http://d.namipan.com/d/55b940faa3dd8ec5885507e1d55f9a22dc2e0d5cf49d7000

你好，为什么我把你的文献链接进去就不是啊？能把这几篇文献发给我看看么？谢谢
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21楼2012-04-01 10:00:21
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125834359

新虫 (初入文坛)
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116635楼: Originally posted by adslye at 2010-11-21 14:56:51
常用那几款软件都行，你按kit要求来就好，没什么难的。不放心多设计几条。
建议：1，不要太靠近已知序列边缘，这样测序结果不好比对。
         2，把特异性放在第一考虑的。这个实验杂带相当多。
如果设计引 ...

哥  BD的试剂盒很贵啊  6000多啊  我是自己做，但是接头不知道怎么做 你知道吗？
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22楼2012-11-29 23:41:09
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)
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5楼: Originally posted by adslye at 2010-11-21 11:11:27
富含GC你先不用考虑，先理解实验。
你看看这个试剂盒的说明书吧：http://www.docin.com/p-1308436.html
不过不建议你买takara的这个kit。我在用，效果不好~
推荐用 BD UniversalGenomeWalker kit  这个会好很 ...

你好，我最近也在扩未知片段，用的Takara的试剂盒，但是扩增了好多次，扩出来的不同片段DNA去测序与已经序列的末端比对，都比对不上。只有设计的引物那20多个bp一样，前面距离位置序列100多个bp完全不匹配，这要怎么解决啊？求大神支支招
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23楼2018-05-03 14:19:09
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)
楼主你好，我最近也在扩未知片段，想问问你做的怎么样了？请教下，我用的Takara的试剂盒，但是扩增了好多次，扩出来的不同片段DNA去测序与已经序列的末端比对，都比对不上。只有设计的引物那20多个bp一样，前面距离位置序列100多个bp完全不匹配，这要怎么解决啊？
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24楼2018-05-03 14:19:44
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