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【求助】关于大孔树脂
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最近用一种大孔树脂进行某黄酮的吸附试验,碰到了以下问题,希望在这方面有经验的朋友们能帮我解惑,将不胜感激! 1.大孔树脂装柱吸附后用水洗去杂,因为看到很多文献上都是说的洗至流出液为无色,可是无论我洗多久流出液都是黄色的,而且经检测里面含有不少黄酮.....所以疑惑了,我这水洗去杂应该以什么为标准啊?水洗流出液澄清就可以了吗?还是我需要以别的什么指标来考察? 2.水洗(我洗了很久,估计用了20BV水,流出液澄清的)之后,我用70%乙醇洗脱,我是在水刚好到达柱子上界面时加洗脱剂的,所以柱子里面还有水,与此同时开始收集,结果前面出来的洗脱液很浑浊,好似乳化了一样,(这时已经有大量黄酮被洗脱下来了,因为颜色很深),最后结果就是我收集的第一管液体分层了,上面一层是黄酮溶液,下面一层为乳化的不知名液体!理论上我的洗脱液应该都是澄清透明的才对啊......难道是我的大孔树脂没有处理干净,里面还有残留的制孔剂? 3.紧接上面一个问题,就是70%乙醇洗脱剂上柱之后,柱子里面就产生了很多气泡,要怎样才能不产生气泡呢? 4.洗脱液流速对黄酮洗脱效率影响大吗?需要做单因素试验进行考察吗? 问题有点多,也不知道我表述清楚没有......希望知道的虫友们能帮帮我!感谢大家了!!! |
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