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lilirong2009

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】引物的PCR Tm值请教

我设计了几种引物，长度都为18bp，用公式 Tm=4(G+C)+2(A+T)-5℃  计算得Tm值为43℃左右，那PCR时按算法 Tm-5℃ 设退火温度时，退火温度就只有三十几摄氏度了，这样设的话退火温度是不是太低？合理吗？怎么设置退火温度比较合理啊？
我其中一对引物为 5‘-AAGACTCCTATCACTATG-3’  Tm 45℃
                           5‘-TAAAAGATTTGTGGCATA-3’  Tm 41℃

   谢谢指教!

[ Last edited by lilirong2009 on 2010-11-17 at 17:27 ]

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1楼2010-11-17 17:19:24

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anik

银虫 (正式写手)

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为什么不用Oligo6软件呢？

4楼2010-11-17 21:49:26

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