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kakaqa

铜虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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在线: 13.2小时
虫号: 997081

[交流] 【求助/交流】请教3000bp的条带的连接问题

我克隆基因扩增得到了一个3000bp的片段，现在问题来了，我们实验室只有pMD18-T这种载体，听说这种载体连接3000bp的片段有点难度，但也能连上，请教用这种载体连过3000bp条带的高手，连接体系是怎样的，多少度需要连接多久，我已经做了3次了，结果都是失败，相当的郁闷啊！！！

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1楼2010-11-11 18:59:10

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zgb1982

木虫 (正式写手)

应助: 46 (小学生)
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虫号: 664342

单纯从连接上讲，不算难连吧，我连过4.3Kb的，4度过夜，10ul体系，测序了，不过存在突变位点。

9楼2010-11-13 22:06:53

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