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hflf

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】双酶切及同尾酶疑问 已有2人参与

在设计引物时犯了一个错误,设计了xhoⅠ和salⅠ的双酶切,查了一下资料听说载体去磷酸化可以减少自连。我的情况有点复杂,打算把两个片段同时连进一个载体,载体的酶切位点是BamHⅠ和 xhoⅠ,一个片段是BamHⅠ和salⅠ,另一个是salⅠ和xhoⅠ,如果能连起来是这样的的一个图谱:
——BamHⅠ——salⅠ——xhoⅠ——,就是因为xhoⅠ和salⅠ是同尾酶怕到时候后面的片段连不进去啊,真是头痛,高手帮忙看看,该怎么解决这个问题?
万分感谢!
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行到水穷处,坐看云起时!
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流 2010-11-11 12:37:03
同尾酶不是说连不进去,而是载体容易自连,并且片段容易连反。
Thank-you,so-blue.
3楼2010-11-11 10:35:38
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hflf

金虫 (小有名气)

所以说问题很多,不知道怎么解决呢
行到水穷处,坐看云起时!
4楼2010-11-11 17:57:10
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