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longyu2728

金虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】养细胞的进！！培养液中如果添加胰岛素，我买的是粉剂。

我想请教下胰岛素的问题啊，细胞培养中是把胰岛素粉末直接加到培养液中还是先配成一个胰岛素的储备液啊/

我现在买来的是分装的sigma的粉末

现在有两种方法：
一，用1640配储备液
先配上称10mg 用1640稀释到比如到5ml，然后分装到10个小ep管中（每个0.5ml）冻存每次配100ml培养液时就加0.5ml 你看这样行不行啊

二，是文献中搜到的一种制备胰岛素原液的方法，
如下，但看着好麻烦，
胰岛素干粉： 2mg加1ml水(盐酸调节水为PH 2.0)( 此为说明书所写），保存温度：-20度。
1.10mg溶于5ml pH2.0的盐酸溶液，浓度为2mg/ml。过滤。
2.分为20份，每份0.25ml含0.5mg，分装在EP管里，保存在-20度。
3.取2份即1mg加入100毫升培养基里，终浓度为10mg/ml。（盐酸为0.5ml.本人已证明对100毫升pH 为7.4的培养基的pH不会有明显影响）

******
大家有弄过的吗，粉末的，谢谢啊，问题比较急!比较急！！

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1楼2010-11-09 20:35:23

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Ritaslj1030

新虫 (初入文坛)

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★
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引用回帖:

Originally posted by longyu2728 at 2010-11-09 20:35:23:
我想请教下胰岛素的问题啊，细胞培养中是把胰岛素粉末直接加到培养液中还是先配成一个胰岛素的储备液啊/

我现在买来的是分装的sigma的粉末

现在有两种方法：
一，用1640配储备液
先配上称10mg 用1640稀释 ...

LZ，我也很想知道这个问题。最后你是咋办的了。我想的是直接溶DMEM溶解