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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 【求助/交流】养细胞的进！！培养液中如果添加胰岛素，我买的是粉剂。
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longyu2728

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】养细胞的进！！培养液中如果添加胰岛素，我买的是粉剂。

我想请教下胰岛素的问题啊，细胞培养中是把胰岛素粉末直接加到培养液中还是先配成一个胰岛素的储备液啊/

我现在买来的是分装的sigma的粉末

现在有两种方法：
一，用1640配储备液
先配上称10mg 用1640稀释到 比如到5ml，然后分装到10个小ep管中（每个0.5ml）冻存  每次配100ml培养液时就加0.5ml 你看这样行不行啊

二，是文献中搜到的一种制备胰岛素原液的方法，
如下，但看着好麻烦，
胰岛素干粉： 2mg加1ml水(盐酸调节水为PH 2.0)( 此为说明书所写），保存温度：-20度。
1.10mg溶于5ml pH2.0的盐酸溶液，浓度为2mg/ml。过滤。
2.分为20份，每份0.25ml含0.5mg，分装在EP管里，保存在-20度。
3.取2份即1mg加入100毫升培养基里，终浓度为10mg/ml。（盐酸为0.5ml.本人已证明对100毫升pH 为7.4的培养基的pH不会有明显影响）

******
大家有弄过的吗，粉末的，谢谢啊，问题比较急!比较急！！
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1楼 2010-11-09 20:35:23
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richujs

木虫 (正式写手)
longyu2728(金币+5):谢谢回帖 2010-11-12 17:11:38
没有用过。一般放-20度可以保藏的时间长一些，4度时间长了可能会有影响
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4楼2010-11-10 16:35:28
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richujs

木虫 (正式写手)
longyu2728(金币+2): 2010-11-12 17:11:47
就按照说明书来吧，这还叫麻烦
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2楼2010-11-09 21:29:50
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longyu2728

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by richujs at 2010-11-09 21:29:50:
就按照说明书来吧，这还叫麻烦

请问你配过么？

如果用第一种方法，用1640或PBS配后，放在-20°下，不会失效吧，
好恐怖啊
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3楼2010-11-09 21:58:11
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longyu2728

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by richujs at 2010-11-10 16:35:28:
没有用过。一般放-20度可以保藏的时间长一些，4度时间长了可能会有影响

那你用盐酸溶解胰岛素后溶液的颜色，
是很澄清很透明的颜色吗，像纯水一样？？
很想知道溶解在盐酸后的状态
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5楼2010-11-12 17:13:29
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