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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】干扰载体
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jackiechubut

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】干扰载体

构建的干扰表达载体转入模式生物中（拟南芥，烟草），northern检测是否可以检测到dsRNA的存在？
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1楼2010-11-08 22:22:00
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jackiechubut

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by randomqd at 2010-11-09 08:28:10:
干扰RNA表达载体的表达沉默dsRNA，是要检测被沉默的dsRNA吗？
如果你设计的siRNA干扰序列合理的话，一般干扰的效率都是很高的。
当然也不会是100%，
看你想要的结果，应该是会留下一点痕迹的。
关键还是看你做 ...

我做的是在植物体内表达外源基因的干扰载体，所以想知道能否在转基因植物中检测到dsRNA，还是只能检测到小RNA的存在？
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3楼2010-11-09 10:10:40
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jackiechubut

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by randomqd at 2010-11-09 16:28:21:
没看懂你说的是转基因植物，还是干扰后的转基因植物。
建议看一下植物的沉默机制。
找几篇有关基因沉默的文章
植物沉默抑制子的也可以
有好多文章：比如在GFP转基因植物中瞬时表达外源基因转进去外源GFP，产生 ...

我做的是利用这个机理来抗虫，所以设计了干扰载体，干扰片段是昆虫体内的。转入烟草和拟南芥中进行抗虫实验，想知道这样获得的转基因烟草体内是否可以检测到dsRNA的存在
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5楼2010-11-09 17:17:10
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jackiechubut

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by randomqd at 2010-11-09 19:14:46:
外源RNA进来被沉默后，应该是很微量的，杂交能不能出条带就不晓得了，
虽然没做过用昆虫做载体的，但是外源DSRNA进来估计是要被沉默的。
但是没做过。没发言权。

干扰载体表达了的话在RNA水平上开始就是产生dsRNA，但是不知道是否能够检测到，因为之后就会生成小RNA
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7楼2010-11-09 19:19:17
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