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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】BSA法测蛋白质浓度的原理和方法
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gaogaoxing

铁杆木虫 (正式写手)
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Originally posted by enclve at 2010-11-12 04:42:35:
  BCA还是BSA????????? 听你语气要BCA吧？？  那我更推荐bradford

是BSA啊。
bradford 如何操作啊？
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11楼2010-11-12 17:04:02
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gaogaoxing

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by herenren at 2010-11-12 11:44:24:
我以前一般用紫外法做标准曲线检测浓度

我以前也用紫外法测试，可是有点麻烦，呵呵。所以想换个简单点的。
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12楼2010-11-12 17:05:11
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herenren

禁虫 (著名写手)
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13楼2010-11-12 17:07:31
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gagalady

新虫 (正式写手)
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其实就是坐标轴与二元一次方程
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14楼2010-11-12 17:10:15
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gaogaoxing

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by herenren at 2010-11-12 17:07:31:


紫外测不麻烦啊。。。。做一个标准曲线
以后每次测就读书换算浓度就行了

主要是测紫外要去别的实验室，有点麻烦，呵呵。
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15楼2010-11-12 17:10:53
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herenren

禁虫 (著名写手)
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16楼2010-11-12 17:12:20
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xhjggl

木虫 (正式写手)

上海生工有 021-37772436

★ ★ ★
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lstt09nk(金币+2):感谢提供 2010-11-19 13:37:26
Bradford Protein Assay Kit
Bradford 蛋白质定量检测试剂盒       
产品说明：Bradford试剂蛋白定量是一种快速，即用型的总量蛋白光学定量方法，在酸性条件下，考马斯亮兰G-250染料与蛋白质疏水区结合，导致最大吸收峰由465 nm 变为595 nm，同时颜色也由棕色变为蓝色,该蓝色化合物颜色的深浅与蛋白质浓度的高低成正比关系。将蛋白质样品或稀释的BSA 与Bradford试剂混合，测量在595 nm处的吸收值，在建立由一系列稀释的BSA建立的标准曲线的情况下，蛋白质的浓度可以根据标准曲线而确定。
产品特点：
1、 检测速度快，10-20个样品只需不足10分钟即可完成；
2、 灵敏度高，最小检测蛋白量达到0.2微克，待测样品体积为1-20ul；
3、 在10-150微克/毫升浓度范围内有较好的线性关系；
4、与还原性糖和还原性巯基试剂兼容；
5、可以采用分光光度法或酶标板法对蛋白进行定量。
编号        包装        价格        产地
SK3031        1000 Assays        150        生工
SK3033        1000Assays +10Microplates        230        生工

Modified Bradford Protein Assay Kit
改良型Bradford蛋白浓度测定试剂盒       
产品说明：在使用常规Bradford试剂进行蛋白定量时，考马斯亮兰G-250染料分子之间，以及G-250与蛋白质复合物之间会发生聚集，随着时间的延长，产生可见的易沉降的颗粒，使得在595nm处测定的吸光度值A595时，蛋白质浓度的定量偏低。针对此种情况，本试剂盒通过添加特殊的试剂，使得考马斯亮兰G-250染料分子之间，以及G-250与蛋白质复合物在30分钟内不容易发生沉降，从而提高了测量结果的准确性。使得大量样品的定量变的从容不迫。
产品特点：
1.在30分钟内，G-250染料分子和G-250与蛋白质复合物不容易发生沉淀；
2.无论是分光光度法或酶标板法都有大小两种定量范围的操作方法；
3.还能够适应疏水的膜或粘蛋白的定量；
4.比较合适于从容不迫地进行大量样品的定量；
5.与常规的Bradford法相比，线形关系更佳，保证了结果的准确性。
编号        包装        价格        产地
SK3041        1000 Assays        360        生工

BCA Protein Assay Kit
BCA蛋白质定量检测试剂盒       
产品说明：BCA法是理想的蛋白质定量方法，在碱性环境下蛋白质分子中肽键结构与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+。BCA特异地与Cu1结合形成稳定的紫蓝色复合物，在562 nM处有最大的光吸收值并与蛋白质浓度成正比，颜色的深浅与蛋白质的含量成正比，可以根据吸收值测定蛋白质浓度。该测定方法灵敏度高，操作简单，试剂及其形成的颜色复合物稳定性俱佳，并且受干扰物质去垢剂等影响小。
产品特点：
1.准确灵敏，线性范围广，BCA试剂的蛋白质测定范围是25－500μg/ml;
2.快速：45分钟内完成测定，比经典的Lowry法快4倍而且更加方便;
3.不受样品中离子型和非离子型去污剂影响;
4.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马氏亮蓝,可以酶标板法或分光光度计法测定蛋白质浓度。
编号        包装        价格        产地
SK3021        500 Assays        450        生工

Modified BCA Protein Assay Kit
改良型BCA蛋白浓度测定试剂盒       
产品说明：在碱性环境中，蛋白质和Cu2+离子结合并将其还原成Cu+离子。BCA与Cu+离子结合形成稳定的紫蓝色复合物，在562nm处有最大光吸收并与蛋白质浓度成线性关系，据此可测定蛋白质的浓度。与Lowery法相比，BCA法最大的优点就是不受去垢剂的影响。但样品中若存在还原剂，同样可以将Cu2+离子还原成Cu+离子，从而提高光吸收值。本试剂盒中的试剂C可以有效地降低蛋白质抽提样品中残留的还原剂对蛋白质浓度检测的干扰。当样品中的DTT浓度≤5mM或β-巯基乙醇浓度≤10mM时，蛋白质浓度的测定不会受影响。
产品特点：
1.在样品中的DTT浓度≤5mM或β-巯基乙醇浓度≤10mM时，光吸收值不受影响；
2.可以采用酶标板法或分光光度法进行蛋白质定量，定量范围为25-1000ug/ml；
3.需要的样品体积5-25ul；
4.不受样品中低浓度的离子型和非离子型去污剂影响。
编号        包装        价格        产地
SK3051        500 Assays        500        生工

Micro BCA Protein Assay Kit
BCA法微量蛋白质浓度测定试剂盒       
产品说明:BCA法是理想的蛋白质定量方法，在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+。BCA与Cu1+结合形成稳定的紫蓝色复合物，在562 nM处有最大的光吸收值并与蛋白质浓度成正比，据此可测定蛋白质浓度。该测定方法灵敏度高，操作简单，试剂及其形成的颜色复合物稳定性俱佳，并且受干扰物质去垢剂等影响小。本试剂盒适用于微量蛋白质浓度的测定。
产品特点：
1.适用于浓度比较稀的蛋白质样品的定量；
2.定量范围：分光光度法0.5-20μg/ml；酶标板法2-40μg/ml；
3.与离子型或非离子型去污试剂兼容；
4.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马氏亮蓝。
编号        包装        价格        产地
SK3061        1250 Assays        360        生工

Lowry Protein Assay Kit
福林酚蛋白浓度测定试剂盒       
产品说明: 在碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物。此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂（Folin 试剂）还原，产生深蓝色（磷钼蓝和磷钨蓝混合物），这种深蓝色的复合物在745-750nm处有最大吸收峰，颜色深浅与蛋白质含量成正比。此法操作简便，灵敏度比双缩脲法高100 倍。
产品特点:
1．不同蛋白质分子之间的变异系数教小;
2．在40分钟内可以完成蛋白质定量过程;
3．有酶标板法和分光光度法两种定量程序
4．定量范围为5-100ul/ML蛋白质。
编号        包装        价格        产地
SK4031        1000 Assays        150        生工
SK4033        1000 Assays  +10Microplates        230        生工

Stable Lowry Protein Assay Kit   
稳定型Lowry法蛋白浓度测定试剂盒       
产品说明: 碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物。此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂（Folin 试剂）还原，产生深蓝色（磷钼蓝和磷钨蓝混合物），颜色深浅与蛋白质含量成正比。此法灵敏度比双缩脲法高100 倍，定量范围为5-100μg/ml蛋白质。经典的Lowry法的主要缺点是由Reagent A和B按照一定比例配置成的碱性铜试剂（Reagent C）不稳定,需要当天配制，经典的Lowry法产生的颜色稳定性也不高，在反应20-120min内变化9.2%。本试剂盒采用一种改进的即用型稳定的碱性铜试剂代替经典Lowry法的Reagent A；B；C，使得实验操作更加的简单便捷，反应产生的蓝色复合物能够稳定存在至少2小时。而且该稳定型碱性铜试剂在4度，避光的条件下可稳定保存至少6个月以上，实验制得的标准曲线与经典方法基本吻合。用酶标板使用1000次或分光光度法100次。
产品特点：
1．即用型而且稳定的碱性铜试剂，使用更加方便；
2．有离心管法和酶标板法两种定量方法；
3．蛋白质浓度的线性范围在5-100μg/ml；
4．高的灵敏性保证了低蛋白质浓度样品的精确定量。
编号        包装        价格        产地
SK4051        1000 Assays        260        生工

Modified Lowry Protein Assay Kit   
改良型Lowry法蛋白浓度测定试剂盒       
产品说明: 在碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物。此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂（Folin 试剂）还原，产生深蓝色（磷钼蓝和磷钨蓝混合物），颜色深浅与蛋白质含量成正比。此法操作简便，灵敏度比双缩脲法高100 倍，定量范围为5-100μg/ml蛋白质。通过特殊的沉淀试剂可以完全去除蛋白质样品中的大部分干扰物质,而蛋白质的损失几乎为零.保证了结果的准确性和提高了定量的灵敏度。
产品特点:
1．特殊的沉淀试剂去除蛋白质样品中干扰物质，比常规lowry有更好的线性关系，结果更准确;
2．不同蛋白质分子之间的变异系数教小;
3．有酶标板法和分光光度法两种定量程序;
4．定量范围为5-100μg/ml蛋白质。
编号        包装        价格        产地
SK4041        1000 Assays        180        生工


非干扰型蛋白浓度测定试剂盒   
Non-Interference Protein Assay Kit       
产品说明: 非干扰型蛋白质定量试剂盒是排除决大多数实验室常规试剂的干扰的光学定量方法，它可以去除离子，非离子，两性去污试剂，还原试剂，螯合试剂，Tris ，糖，盐酸胍等变性试剂，对于在Laemmeli buffer等蛋白质上样缓冲液，2D sample extraction buffer,高浓度的β-mercaptoethanol (<15%) ,脂质体中的蛋白质也可以定量,蛋白质量在0.5-50µg 之间有良好的线性关系,需要的样品体积在1-50µl ,特殊的沉淀试剂可以去除掉绝大多数干扰物质,被沉淀的蛋白质与含有铜的碱性物质相混合,未与蛋白质相结合铜在被还原为一价后与特定的生色试剂反应,产生特定的480nm吸收波长,所以随着蛋白质的浓度增加,,未与蛋白质结合铜相应减少,这样特定的吸收波长的吸收值与溶液中的蛋白质浓度成反比,这种蛋白质定量方法不受氨基酸副链和蛋白质的种类的影响，本试剂盒可以做250次微量定量。
产品特点：
1．整个实验过程大约只需要40分钟左右;
2．定量过程不受到非蛋白的去污试剂，还原试剂，螯合试剂，Tris ，糖，变性试剂，化学药品，抗生素等的影响;
3．定量范围在0.5-50µg，只需要1-50ul的样品;
4．比较适合于对2D电泳用的细胞或组织裂解液所提取的蛋白样品直接进行定量。
编号        包装        价格        产地
SK3071        250 Assays        500        生工
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17楼2010-11-18 21:54:38
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gaogaoxing

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xhjggl at 2010-11-18 21:54:38:
Bradford Protein Assay Kit
Bradford 蛋白质定量检测试剂盒       
产品说明：Bradford试剂蛋白定量是一种快速，即用型的总量蛋白光学定量方法，在酸性条件下，考马斯亮兰G-250染料与蛋白质疏水区结合，导致最大吸收 ...

太感谢你了！！
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18楼2010-11-19 12:51:31
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lowry_tsang

银虫 (正式写手)
买个测蛋白的试剂盒吧
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19楼2012-06-10 15:04:26
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wxm0322

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我是按药典三部上的方法测得，用酶标仪测得吸光度，R平方值有0.998
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我要提高
20楼2014-04-12 16:49:33
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