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【求助/交流】大肠杆菌超声破碎条件求助
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peximin
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[交流]
【求助/交流】大肠杆菌超声破碎条件求助
我想要提取大肠杆菌的全蛋白,要用超声破碎的方法。想请教各大虾,我的
超声参数为什么好呢?如:该超多长时间,间歇多长时间;共超几分钟;用多大的功率啊?
谢谢指导啊!
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1楼
2010-11-07 17:17:03
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雯子027
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专业: 环境微生物学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我的菌液OD六七十,离心后沉淀用缓冲液重悬,破碎条件是:工作1s,间歇2s,功率180W,20min可以破到基本澄清。如果OD小的话,破的时间会比较短。
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3楼
2014-03-24 15:40:15
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微笑漩涡
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专业: 生物大分子结构与功能
★ ★
amisking(金币+2):鼓励交流! 2010-11-07 22:34:28
peximin(金币+2): 2010-11-08 09:32:11
看你菌体的量,菌体越少,破碎时的功率越小,相应的时间也越短。
我们破500mL LB回收的菌液的条件是:20-30mL 缓冲液重悬,300W,工作5s,间
歇7s,共破100次。
祝好运。
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2楼
2010-11-07 17:20:26
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雯子027
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专业: 环境微生物学
补充下,我是取1ml菌液,用的2mm的探头。如果体积大的话,需要换大探头,条件跟我用的就不一样了。
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4楼
2014-03-24 15:42:03
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