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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】SDS-PAGE检测蛋白纯度
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求知的学生

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE检测蛋白纯度 已有11人参与

大家好，我现在有一些蛋白质的冻干粉，想用SDS-PAGE测一下纯度，应该如何做？胶跑完之后，该如何处理，怎么计算浓度？望不吝赐教，谢谢！
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1楼 2010-11-03 11:48:27
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王晓娟

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by hzxizh at 2010-11-03 22:45:52
要测纯度，建议15%的分离胶电泳；但最好用HPLC。
要测浓度，建议BSA标定曲线，用福林酚法测定。不要有电泳估算蛋白浓度。

请问假如跑完胶后，要利用亮度估测蛋白含量，怎么做呢？谢啦~
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23楼2013-07-10 12:09:34
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
求知的学生(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-11-03 14:25:25
求知的学生(金币+1): 2010-11-03 17:11:00
蛋白粉加LOADING BUFFER后加热处理，再SDS-PAGE电泳，考马斯亮蓝或者银染，检测纯度。测浓度的话用考马斯亮蓝G250法595nm测定好了。具体操作一般的实验书上都有的。
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3楼2010-11-03 14:21:56
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★
求知的学生(金币+1):谢谢参与
楼上说得很全了，
另外建议，
如果自己没做过，还是找个此类实验室的好。

那些试剂自己配太麻烦了。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2010-11-03 16:10:59
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求知的学生

金虫 (小有名气)
谢谢各位的热心解答！
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5楼2010-11-03 17:12:16
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