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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】关于HPLC的问题
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zhaolin3759

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】关于HPLC的问题 已有3人参与

各位对大家好，我想通过HPLC来测溶解度非常低的药物从高分子胶束中释放的的速度，但是我是第一次接触HPLC,所以很多基本的知识都不太清楚，请各位多多指教！
首先在选择流动相时有什么基本的要求吗？比如说是不是一定要选择一种能够把我的样品溶解的溶剂。再就是我准备做HPLC测试的样品是以PBS(pH=7.4)或者醋酸-醋酸钠（pH=5）的缓冲溶液作为溶剂的，还需要对样品进行进一步处理吗？
或者说所用的流动相与制备样品溶液时所用的容剂是同种溶剂吗？

[ Last edited by zhaolin3759 on 2010-11-1 at 21:12 ]
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1楼 2010-11-01 18:31:10
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ethunter

银虫 (小有名气)
zhaolin3759(金币+5): 2010-11-03 10:29:41
溶解度低是在水中吗？在乙腈和甲醇里溶解怎么样？不行的话在流动相里加点缓冲剂，酸可以最好别用碱，对柱子不好。
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3楼2010-11-03 10:07:24
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junliangwu

木虫 (著名写手)
zhaolin3759(金币+10):谢谢 2010-11-03 10:21:14
像你叙述的检测，一般选用碳18柱
柱子要求只能用甲醇，水，乙腈，乙酸等极性的流动相，如果出峰拖尾可以加入缓冲溶液，怎样加网上应该能搜到
做样时要求样品完全溶解，你可以选择混合流动相中的一种溶剂作为溶解样品的溶剂，也可以选混合溶剂溶解，悬浊液或乳浊液不能检测
如果制备的测试液是澄清的，不需要进一步处理可以检测，如果浓度过大需要需要稀释后检测
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2楼2010-11-03 09:37:37
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zhaolin3759

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by junliangwu at 2010-11-03 09:37:37:
像你叙述的检测，一般选用碳18柱
柱子要求只能用甲醇，水，乙腈，乙酸等极性的流动相，如果出峰拖尾可以加入缓冲溶液，怎样加网上应该能搜到
做样时要求样品完全溶解，你可以选择混合流动相中的一种溶剂作为溶解 ...

请问在做样是所选的溶剂一定要与流动相相同吗？或者流动相为混合溶剂的话要从混合溶剂中选择一种溶剂或者就以混合的流动相为溶剂？
实验室仪器一般用甲醇做为流动相，如果我要用THF做为流动相，需要换柱子吗？还是只要清洗一下就可以了啊？
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4楼2010-11-03 10:27:40
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zhaolin3759

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by ethunter at 2010-11-03 10:07:24:
溶解度低是在水中吗？在乙腈和甲醇里溶解怎么样？不行的话在流动相里加点缓冲剂，酸可以最好别用碱，对柱子不好。

在水和甲醇，乙醇中基本不容，在乙腈中能溶解部分，但溶解度不太高。
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5楼2010-11-03 10:29:28
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