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风云白荷

铜虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 150.5
红花: 1
帖子: 12
在线: 9.5小时
虫号: 1033930
注册: 2010-06-02
性别: MM
专业: 蛋白质组学

[交流] 【求助/交流】染色质免疫共沉淀已有8人参与

各位大虾，大家有没有做这个的啊？我是个新手，想向各位请教一下超声波破碎的条件摸索，从哪几个方面入手，因为它要求片断要破碎到200-1000bp，我怎么破都在200-1500左右，请不吝赐教！

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1楼2010-11-01 17:29:37

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风云白荷

铜虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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reasonspare:如果我没有猜错的话，你的超声波和前面冲有说的不同，他们说是水浴那种 “中间不休息哈哈“，你所用的是探头那种，它是虫友给你线索是可以摸索的，固定中等率， 10s 超声，30s 间隔，你可以改变循环次数，10个循环不行15, 20, 30, 40, 哈哈。注意随时换冰。 2010-11-05 11:47:57
reasonspare:编辑内容 2010-11-05 11:57

引用回帖:

Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-11-04 21:57:26:
难道我上面说的时间梯度还不够明确么

谁来告诉我，我的表达到底存在神马问题……………………

时间梯度没问题，难道我的超声波破碎和你的不一样吗？你超声波破碎的时候不是要设置功率，超声波破碎的时间，还有间隔时间吗？难道你的破碎中间不休息的吗？机器一直在工作吗？那样热量不是很大吗

——————————————————————————-
发现自己写得自己也看不清楚再来一遍：

如果我没有猜错的话，你的超声波和前面“三磷酸”说的不同，他们说的是水浴那种 “中间不休息哈哈“，设定功率（功率调节比较粗糙，没有超声频率，只有个超声频率）后只能调整时间，非常温和的水浴超声仪。你所用的是探头那种（可供选择的参数：超声频率，超声频率（前边两个参数不一定都出现，不同厂家有异），超声时间，间隔时间，循环次数），这种超声波功率很大，产生大量的热，所以必须冰浴。

但是三磷酸虫友给你线索还是可以参考，固定中等率或者频率通常10-50, （超过100，要减少超声时间，否则打碎不光你的DNA 蛋白，还有你的探头）， 10s 超声，30s 间隔，你可以改变循环次数，10个循环不行15, 20, 30, 40, 哈哈。注意随时换冰

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[ Last edited by reasonspare on 2010-11-5 at 11:57 ]