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xmasylm

铜虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】为什么镍柱纯化可溶性蛋白，电泳结果总是显示不纯呢？已有8人参与

3月份做过一次，在200mM咪唑和500mM咪唑洗脱组分中都有很纯的目的蛋白。最近做的时候，总是有杂蛋白。用平衡液洗杂蛋白的体积和时间是差不多的。不知道为什么就是不纯？
蛋白是重组菌落经IPTG大量诱导表达得到。在优化后的条件下表达。（适于可溶性目的蛋白表达）。
还有，我这周在纯化时所用的所有液体都保持在4度左右，这会不会对过柱有影响呢？

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1楼2010-10-23 20:20:42

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charles08

铁杆木虫 (著名写手)

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专业: 植物病理学

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

我也碰到这个问题，第一次做纯化，纯化后背景条带不干净，还有很多杂带。不知如何清除

10楼2017-11-22 04:29:06

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