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feiye2214

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】十万火急,IPTG诱导是怎么回事,给我说个大概 已有5人参与

RT:IPTG诱导大致原理
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临风7071

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-10-23 12:01:44
引用回帖:
Originally posted by feiye2214 at 2010-10-22 20:13:51:

遇到高手了,我就把我做的跟你说说,帮我看看哈!

我将EGFP基因(来自pEGFP-1,酶切位点是Not I/EcoR I)插到上图的pGEX-4T-1的Not I/EcoR I中 ...

你的载体是tac启动子,就是trp启动子和lac启动子合成的新的启动子,所以需要iptg的诱导,所以转化到大肠杆菌BL21中,要是BL21也可以是BL21(DE3),因为BL21是有蛋白酶缺陷的菌株,不会降解目的蛋白。一般我们表达就用BL21(DE3)就行了
7楼2010-10-23 10:07:43
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
  网上到处都是,baidu or google
2楼2010-10-22 14:29:00
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看懂了乳糖操纵子就知道IPTG诱导的原理了
3楼2010-10-22 14:56:45
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feiye2214

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2010-10-22 14:56:45:
看懂了乳糖操纵子就知道IPTG诱导的原理了

如果我的目的基因的载体没有乳糖操纵子,就不能表达了吗?
还是有其他的诱导方式?pGEX-4T-1装载一个目的基因
4楼2010-10-22 17:10:58
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